分子生物学考试资料.docVIP

参与蛋白质生物合成体系的组分有哪些?它们具有什么功能? 1 mRNA：蛋白质合成的模板； 2 tRNA：蛋白质合成的氨基酸运载工具； 3 核糖体：蛋白质合成的场所；⑷辅助因子： a 起始因子—参与蛋白质合成起始复合物形成； b 延长因子—肽链的延伸作用； c 释放因子—终止肽链合成并从核糖体上释放出来。 原核细胞和真核细胞在合成蛋白质的起始过程有什么区别。 1 起始因子不同：原核为IF-1，IF-2，IF-2，真核起始因子达十几种： 2 起始氨酰-tRNA不同：原核为fMet-tRNAfMet，真核Met-tRNAMet： 3 核糖体不同：原核为70S核粒体，可分为30S和50S两种亚基，真核为80S核糖体，分40S和60S两种亚基。 请比较原核生物和真核生物mRNA的结构特征；真核生物的帽子结构的加工方式和功能；Poly（A）的加工方式和功能。 1 原核生物的半衰期短（2）许多原核生物mRNA可能以多顺反子的形式存在，（3）原核生物mRNA5端无帽子结构，3端没有或只有较短的poly A结构；真核生物的5端存在帽子结构（4）绝大多数真核生物mRNA具有多聚A尾巴。 5’帽子结构：在细胞核内对hnRNA的5’端加上m7GTP的结构。在磷酸酶的作用下，将5’端的磷酸基水解，然后再由鸟苷酸转移酶加上鸟苷三磷酸，形成GpppN的结构，尿苷酸-7-甲基转移酶再对G进行甲基化。mRNA5’端的这种结构成为帽子 功能：①对翻译起识别作用—为核糖体识别RNA提供信号②增加mRNA 的稳定性，使5’端免遭外切核酸酶的攻击③与某些RNA病毒的正链合成有关 3’端加尾：在细胞核内完成。首先由核酸内切开mRNA3’端的特定部位，然后由poly A 合成酶催化多聚腺苷酸反应，加入poly A 的尾巴。在poly A 位点上游10－35核苷酸处有AAUAAA序列，下游约50核苷酸处存在富含GU的序列，这两处是剪切和加poly A 所需的信号。由剪切和聚腺苷化特异因子（CPSF）结合到上游AAUAAA序列，剪除刺激因子（CSF）与下游富含GU序列作用，剪除因子（CF）Ⅰ、Ⅱ相继与之结合，使其更稳定。在切除前，poly A 聚合酶结合到复合物上，使剪切后游离的3’端迅速腺苷酸化 功能：①提高了mRNA在细胞中的稳定性②与mRNA的寿命有关③与翻译有关④poly A 在分子生物学实验中有很大应用价值 请简述Lac操纵子模型的主要内容和调控方式。 乳糖操纵元含有z、y和a三个结构基因。z基因以四聚体形式组成有活性的β－半乳糖苷酶，催化乳糖转变为别乳糖，再分解为半乳糖和葡萄糖；y基因编码半乳糖透过酶，促使环境中的乳糖进入细菌；a基因编码转乙酰基酶，以二聚体活性形式催化半乳糖的乙酰化。 原核生物乳糖操纵子（Lac operon）的控制区包括调节基因、启动基因（其CRP结合位点位于RNA聚合酶结合位点上游）和操纵基因；其信息区由β-半乳糖苷酶基因（lacZ）、通透酶基因（lacY）和乙酰化酶基因（lacA）串联在一起构成。当培养基中乳糖浓度升高而葡萄糖浓度降低时，乳糖作为诱导剂与阻遏蛋白结合，促使阻遏蛋白与操纵基因分离；另一方面，细胞中cAMP浓度升高，cAMP与CRP结合并使之激活，CRP与启动基因结合并促使RNA聚合酶与启动基因结合，基因转录激活。trp操纵子是一种阻遏型操纵子，当无色氨酸时，辅阻遏蛋白不能结合O序列，操纵基因开放，开始转录；当细胞内有较大量的色氨酸时，辅阻遏蛋白与色氨酸结合后，可结合O序列，阻遏基因转录。’亚基提供）②DNA/RNA杂交链结合位点（β亚基提供）③双链DNA解链位点（前端α亚基提供）④单链DNA重旋位点（后端α亚基提供）⑤σ因子作用位点（使全酶识别启动子Sextama Box -35区） 试比较转录与复制的区别 相同点：①都是以DNA为模板进行；②复制和转录过程都遵循碱基互补配对原则；③都是从5＇向 3＇方向进行；④都依赖DNA的双链；⑤聚合过程每次都只延长一个核苷酸⑥核苷酸时间的连接都是磷酸二酯键。 不同点：①复制所需的底物为脱氧核苷三磷酸，而转录的底物为核苷三磷酸；②在复制过程中，A—T配对，而在转录过程中是A—U配对；③RNA聚合酶与DNA聚合酶不同，能合成出新链，因此转录不需要引物，而复制需要引物；④复制得到的是与模板链互补的DNA链，而转录得到的是与模板互补的RNA链；⑤转录过程中，只有一条能作为模板链，并且只是一条DNA链的某一区段，而复制中，两条都可作为模板链，都被复制；⑥复制的到的产物与亲代具有高保真性，绝大多数情况下是完全相同的，而转录产物与结构基因相比较，除U与T互换外，成熟的RNA序列与模板序列相差很大。 因子结合于新合成的RNA链，借助水解ATP的能量沿RNA 链运动，当RNA 聚合酶遇终止