2.2.2物细胞融合与单克隆抗体的制备重点.pptVIP

一、动物细胞融合 1、动物融合的过程 请同学们阅读课本P52动物融合 ①.细胞融合的概念 ②.诱导动物细胞融合的方法 ③.意义 并用笔画出来 2、动物细胞融合的概念 动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程 灭活病毒诱导细胞融合的原理： 病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏这些病原体的抗原结构。 植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 8．右图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案。据图回答：　　（1）该方案能达到预期效果吗？　　。原因是 . 。　（2）图中②为　　　过程，常用　　　　作为诱导剂。该细胞继承了 ，因此不仅能分泌 ，还能 。（3）该方案的目的是 。 5、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓疤细胞融合的是 A.经过免疫的B淋巴细胞 B.没经过免疫的T淋巴细胞C.经过免疫的T淋巴细胞 D.没经过免疫的Ｂ淋巴细胞 6、单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞。在这种培养基上不能存活、增殖的细胞是 ①B淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞③B淋巴细胞自身融合细胞④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞⑤杂交瘤细胞 A、① ② ③ ④ B、 ① ③ ⑤ C、① ③ D、② ④ 7． 天津理综 利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列叙述正确的是 A．用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体 B．体外培养单个效应B细胞 浆细胞 可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体 C．将等量效应B细胞 浆细胞 和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞 D．利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者 D 不能 无法获得产生单一抗体的B淋巴细胞. 细胞融合 灭活病毒 双亲细胞的遗传物质 特异性抗体 在体外培养条件下大量增殖 制备单克隆抗体 没有将抗原注入小鼠体内， * * 杂种植株 筛选融合AB 的原生质体 再生出细胞壁 脱分化 愈伤组织 再分化 植物细胞的融合 植物组织培养 植物细胞A 原生质体B 原生质体A 杂种细胞AB 去 壁 去 壁 人 工 诱 导 方法？ 促进融合的方法？ 融合完成的 标志 植物细胞B 植物体细胞杂交技术过程 原理？ 原理？ ⑴.原理： 1、动物细胞融合的基本原理是什么？ 2、动物细胞融合的诱导方式是什么？与植物细胞融合的诱导方式有什么不同？ 与植物原生质体融合的基本原理相同，即细胞膜的流动性。 ⑵.诱导方式： 物理法： 电激、振动、离心 化学法： 聚乙二醇（PEG） 生物法： 灭活的病毒 例如：仙台病毒 动物细胞融合过程示意图 不同DNA的两个细胞 灭活的病毒 有丝分裂 两个完整的杂交细胞 注意：动物细胞的融合也需要把多个两种细胞放在一起，让它们随机融合后，再从中筛选杂交细胞。 意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。 应用：成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段 最有价值的利用是制造单克隆抗体 用途 诱导方法 细胞融合的方法 原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 获得杂种植株 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性 细胞的全能性 去除细胞壁后诱导原生质体融合 使细胞分散后诱导细胞融合 物理（离心、振荡、电刺激） 化学（聚乙二醇） 物理、化学方法（同左） 灭活的病毒 主要用于制备 单克隆抗体 1.能使动物细胞融合的特有的诱导方法是 A．离心 B．灭活的病毒 C．电刺激 D．振动 2.动物细胞融合的目的中最重要的是 A．克服远源杂交不亲和 B．制备单克隆抗体 C．培育新物种 D．生产杂种细胞 二、单克隆抗体 长期以来，为了获得抗体，采用的是把某种抗原反复注射到动物体内，然后从动物血清中分离出所需抗体的方法。用这种方法获得的抗体，不仅产量低，纯度低，而且抗体的特异性差，反应不够灵敏。 1、传统抗体的获得方法 2.抗体是由何种细胞产生的？ 3.一个Ｂ淋巴细胞 浆细胞 能分泌多种抗体吗？ 每个Ｂ淋巴细胞只能分泌一种抗体， 浆细胞（效应B细胞） 4、在体外培养的条件下，一个B淋巴细胞有没有可能无限增殖？ 不可能 5、我们学过的什么细胞具有这样的能力？ 癌细胞 6、有什么办法让B淋巴细胞也具有这样的能力？ 细胞融合 一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞（癌细胞）能无限增殖 杂种细胞 动物细胞培养技术