REAGEN腹泻性贝类毒素（DSP）酶联免疫试剂盒.docVIP

REAGEN?腹泻性贝类毒素（DSP）酶联免疫试剂盒RNA97008 1．REAGEN?腹泻性贝类毒素（DSP）酶联免疫反应测试盒试剂盒特包括： 高回收率（%） 高重现性。 快速的ELISA检测方法（）。 2．试剂盒原理 REAGEN?酶联免疫反应测试盒基于竞争性酶联反应原理，的已经包被于微孔板上 3．试剂盒组成部分和储存 规格 保存条件 DSP二抗包被板 Second antibody-Coated Plate 96孔板（12×8 孔 2-8℃ DSP标准品 Standards ： 0ng/ml阴性质控 Negative control 0.3ng/mL 0.9ng/mL 2.7ng/mL 5.4ng/mL 16.2ng/mL 0.8mL 0.8mL 0.8mL 0.8mL 0.8mL 0.8mL -20℃ -20℃ DSP抗体 Anti-Okadaic Acid Antibody 6mL 2-8℃ HRP酶标记物 Okadaic Acid-HRP Conjugate 6mL 20×浓缩洗液 Wash Solution 30mL 终止液 Stop Buffer 14mL TMB底物 TMB Substrate 12mL 10X样品提取液（10X Sample Extraction Buffer） 25 mL 本试剂盒应当在2-8℃的温度下储存，有效期为一年。-20℃或者冷冻保藏。 4．样品检测下限 检测物质 检测下限（ng/g） ．交叉反应数据 交叉反应率（%） 腹泻性贝类毒素 鳍藻毒素1 40 鳍藻毒素2 46 新蛤蚌毒素 0.01 蛤蚌毒素 0.01 扇贝毒素 0.01 6．未提的设备或材料 酶标仪 微量加样器 10、20100和1000 L各一支 L 甲醇 7．°C，避免在通风口操作防止温度过低，过热和/或者蒸发。同样的，不要在阳光直射下实验，防止过热及蒸发。在孵育期间，如果工作台温度过低，应该铺垫若干纸巾或者其他物料。 水质量很重要，确保使用蒸馏或者去离子水。 加入样品或者试剂到空的微孔板时，吸嘴靠于微孔接近底部，并保持接触。 孵育时间的计算越规范越好，保持添加标准品的一致性，先添加标准品后添加样品。 从低浓度到高浓度地添加标准品，降低影响标准品曲线质量的风险。 将微孔板置于放有干燥剂的密封袋中，冷藏保存。 8． 样品保存在2-4℃不超过1-2天，如果需要保存较长的时间，应该放置-20℃。样品使用前应恢复到室温。 1×样品提取液 按1样品提取浓缩液和双蒸馏水的比例配制。1×样品提取90/10, V/V） 按9体积1×样品提取液和1体积的甲醇溶液的比例配制 贝类 除去贝壳，用双蒸水洗净贝肉； 排除多余的液体，用均质器均质样品成粘稠状； 称取0.5g 均质后的样品加入mL 50%甲醇，5分钟 4000rpm离心10分钟 取0.5ml上清液°C恒温水浴5分钟； 再4000rpm离心10分钟 L到新管中，加入950 L 1×样品提取 90/10, V/V ，混匀，待检测。 稀释倍数30-1620 ppb） 基于实验要求，稀释系数可以进行调整，通过在第7步骤中改变上清液与1×样品提取 90/10, V/V 的体积比。 方法二 除去贝壳，用双蒸水洗净贝肉； 排除多余的液体，用均质器均质样品成粘稠状； 称取0.5g 均质后的样品加入分钟离心10分钟 取500 L上层清液到新管中，添加100 L 2.5 N Na OH溶液，漩涡15—20秒； 在80°C下孵化40分钟； 冷却至室温，添加100 L 2.5 N HCl溶液，漩涡15—20秒； 取上层清液50 L到新管中，加入700 L 1×样品提取 90/10, V/V ，混匀，用试剂盒进行检测 稀释倍数32-1700 ppb）基于实验要求，稀释系数可以进行调整，通过在第8步骤中改变上清液与1×样品提取 90/10, V/V 的体积比。 水样 取50 L水样，添加950 L1×样品提取 90/10, V/V ； 每次取50 l样液用于检测。 稀释倍数：20.（检测范围6-324 ppb） 基于实验要求，稀释系数可以进行调整，通过在第1步骤中改变上清液与1×样品提取 90/10, V/V 的体积比。 9检测步骤以下为计算份量的表格，用户可根据自己的需要来确定需要配置多少试剂。试剂 每个反应需要的体积 24次反应的体积 抗体 50 L 1.2mL 酶标记物 50 L 1.2mL 工作洗液 1.0mL 24mL 终止液 100 L 2.4mL 底物 100 L 2.4mL 加入50 L的标准所设定的孔中；加入50 L的样品所设定的孔中每孔加入50 L；在每孔中加入0 L抗， 轻微孔板混匀； °