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【优化方案】2013高中生物 第一章第2、3节微生物的纯培养 微生物数量的测定课件 北师大版选修1
【答案】 1 D 2 1.17×108 3 多 当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的是一个菌落 4 不能。因为不能排除杂菌来自培养基或来自培养过程。 【探规寻律】 由于有的菌落不只由一个细菌生长而成,即可能由两个或多个细菌长成,所以计算出的样品的菌株数会与实际样品的菌株数有所偏差,即计算出的样品的菌株数往往比活菌的实际数目低。 用涂布分离法来统计样品中活菌的数目。在某稀释浓度下某同学做了若干个平板统计每个平板的菌落数,最接近样品中菌体数真实值的是 A.菌落数量最多的平板 B.菌落数量最少的平板 C.菌落数量适中的平板 D.取若干个平板菌落数量的平均值 变式训练 解析:选D。用涂布平板分离法对样品中活菌数目进行统计,只是一种估测,根据此方法的实验过程可知,在某一稀释度下涂布的平板菌体数具有一定的偶然性,并不是绝对均匀,所以取若干个平板菌落数量的平均值比较接近样品中菌体数的真实值。 对平板划线分离法和涂布分离法 这两种常用的微生物分离方法混淆不清 用划线分离法或涂布分离法纯化大肠杆菌时 ①可以用相同的培养基 ②都需要使用接种针进行接种 ③都需要在火焰旁进行接种 ④都可以用来计数活菌 易错警示 例 A.①② B.③④ C.①③ D.②④ 【解析】 平板划线分离法、涂布平板分离法虽有不同,但都是纯化大肠杆菌的方法,故可以用相同的培养基;平板划线法和平板划线过程为无菌操作,涂布平板分离法在涂布平板操作时也为无菌操作,故都需要在火焰旁进行接 种; 平板划线法使用接种环接种,涂布平板分离法使用无菌玻璃涂棒将菌液均匀涂布在培养基表面,都不是用接种针进行接种;划线法不能用来计数活菌。 【答案】 C 【纠错总结】 平板划线分离法和涂布分离法的比较 平板划线分离法 涂布分离法 概念 通过接种环在琼脂固体培养基表面划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面 将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养 原理 由于划线后,线条末端细菌的数目比线条起始处要少,每次从上一次划线的末端开始,能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落 将菌液进行一系列的梯度稀释,在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞,从而能在培养皿表面形成单个菌落 优点 可以观察菌落特征,对混合菌进行分离 可以计数,可以观察菌落特征 缺点 不能计数 吸收量较少,较麻烦,平板不干燥效果不好,容易蔓延 适用范围 适用于好氧菌 适用于厌氧菌和兼性厌氧菌 栏目导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 第一章 微生物技术 第2、3节 微生物的纯培养·微生物数量的测定 学习导航 1.能进行微生物的分离和培养。 2.会测定某种微生物的数量。 新知初探?思维启动 一、微生物的分离与纯化 1.实验原理 微生物的分离与纯化是将待检测微生物样品通过划线或涂布接种在______培养基上,样品中的每一个细胞或孢子都可以生长繁殖形成单个________。将单个菌落接种到斜面培养基上,经培养后,即可得到一个微生物的______。 固体 菌落 纯种 2.微生物的分离步骤 包括____________、______或_____________ 三个步骤。 3.菌种纯化与保藏 分别从培养后长出的单个菌落上挑取少许细 胞,接种到斜面培养基上,置培养箱或温室中37 ℃培养24 h,斜面上菌种长好后, ________保存备用。 样品稀释 划线 涂布及培养 4℃ 4.分离和纯化微生物是微生物技术的重要操作方法 一般根据微生物对_____________、pH、氧气等要求的不同,供给它们适宜的生活条件,或加入某种__________,造成只利于要分离的微生物生长,不利于其他微生物生长的环境,从而淘汰不需要的微生物,分离得到需要的微生物纯种。 营养物质 抑制剂 1 微生物的分离可以不经过样品的稀释 × 2 无论是平板划线分离法还是涂布分离法均要在酒精火焰旁操作 √ 3 从单个菌落上挑取少许细胞接种到斜面培养基上培养属于微生物的分离技术 × 判一判 二、微生物数量的测定 1.测定土壤中的微生物的数量 1 实验原理 利用________________将待测定的微生物样品按比例作一系列稀释后,吸取________某几个稀释度的菌液接种到平板上,培养一段时间后即可形成菌落,根据______________________ __________即可换算出样品的含菌数。 平板菌落计数法 一定量 稀释倍数、取样接种量 和菌落数 2 实验步骤 90 空白对照 平置 倒置 30~300 要使平板菌落计数法准确,需要掌握哪几个关键步骤? 【提示】 严格执行无菌操作、准确稀释、定量接
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