药品不仅在生产过中会遭到微生物的污染.docVIP

药品不仅在生产过程中会遭到微生物的污染，在检验过程中也会被污染，因此必须采取一定的措施使生产和实验室设施的微生物污染处于受控状态或者完全被消除（如采用隔离技术）。在实际的操作中，可以采用物理和化学的方法来控制微生物的生长，其中化学方法是用化学消毒剂将环境中的微生物杀灭或降低其在环境中的污染程度。 我国GMP规定中强调，设备清洗是必要的验证内容之一。制药企业必须制定清洁和灭菌的标准操作规程 SOP ，并定期进行验证，以确证清洁与灭菌的有效性。每个使用者都应当对消毒剂在各种不同的使用条件下的消毒效果进行评价，因为消毒剂的杀菌结果会受到被消毒表面的类型、与被消毒物的接触时间以及相关设施中的微生物种群的影响，同时，制药企业还应当用从自身环境中分离出来的微生物来测定消毒剂对这些微生物的杀灭效果。 1　验证前的准备 1.1　考虑因素 验证工作要考虑的因素主要有：（1）基于消毒剂本身的消毒能力进行设计及评价；（2）基于生产和实验室环境真实生物负载进行设计及评价；（3）验证内容应包括消毒条件、方法、所用介质、消毒剂浓度、消毒时间、消毒剂的交替使用等；（4）选择合适的试验方案；（5）审计生产／供应商；（6）所有的规程、方法和结果均要形成文件，以提供一个完整的验证项目的永久性书面记录。 1.2　生物负载的测定 对可能污染洁净室的生物负载要进行调查研究，以确定室内存在的微生物数量和种类。测定生物负载的方法一般包括平面取样法、棉签技术和浸演法。 1）平皿取样法。又称Rodac Plate法，仅适用于平整的表面。盘内灭菌琼脂直接与设备或设施表面接触，然后加盖，在预定时间和规定温度下（例如30～35℃或20～25℃）进行培养，用肉眼对微生物计数并识别。如有必要，还需鉴别菌种。普通使用的培养基是标准方法琼脂或标准方法琼脂加卵磷脂和吐温80。此法明显缺点是会将培养基残留在取样点表面。 2）棉签技术和浸渍法。棉签取样能用于Rodac Plate取样法无法取样的场合，例如角落、缝隙等处。棉签可由棉花和涤纶构成，如果是由海藻酸钙做成的最好不过（该材料能溶于稀释液中释放微生物）。棉签用灭菌稀释液预润湿，擦试取样后放入装有预灭菌稀释液的试管中搅动，以释放出微生物，稀释液则注入培养盘培养，然后计数并鉴别。取样的多少必须有规定（例如100cm2），另外必须采用一个恰当的稀释液（例如美国药典中的磷酸缓冲液pH 7.2）。必须注意的是，任何被选定的稀释液必须用一种对照菌种进行抑菌试验。 1.3 选择消毒方法 选择化学消毒剂必须对其某些性质予以鉴定，包括消毒效果的预期水平、作用于微生物的类型、对操作人员的毒性程度和沾染在被消毒设备上的残存量。所选化学消毒剂应能杀死细菌、细菌抱子、酵母和霉菌，而不是仅仅制止它们的繁殖。其杀菌范围应能涵盖对工作现场进行的生物负载测定时发现的微生物种群，且至少应有两种杀菌剂（或5～6种）轮流使用，以避免产生耐药性。 1.4　制定验证方案 验证方案一般应包括前言、责任、步骤、合格标准等内容。“前言”应阐明验证的目的、验证的内容和原因。“责任”应详尽把整个验证的每一个部分落实到具体的部门和个人。“步骤”应说明取样方法（包括取样数量和取样点）以及样品传递到实验室的方法，测试方法应尽可能具体并附有相关SOP和文件表格。“合格标准”必须有限定范围，包括当结果超越限度时如何进行调查和纠正的方法。 由于没有特定的测试方法要求，不同的企业可采用不同的试验方案，理想的做法是将试验方案分为实验室考察和现场考察两部份。 药品不仅在生产过程中会遭到微生物的污染，在检验过程中也会被污染，因此必须采取一定的措施使生产和实验室设施的微生物污染处于受控状态或者完全被消除（如采用隔离技术）。在实际的操作中，可以采用物理和化学的方法来控制微生物的生长，其中化学方法是用化学消毒剂将环境中的微生物杀灭或降低其在环境中的污染程度。 我国GMP规定中强调，设备清洗是必要的验证内容之一。制药企业必须制定清洁和灭菌的标准操作规程 SOP ，并定期进行验证，以确证清洁与灭菌的有效性。每个使用者都应当对消毒剂在各种不同的使用条件下的消毒效果进行评价，因为消毒剂的杀菌结果会受到被消毒表面的类型、与被消毒物的接触时间以及相关设施中的微生物种群的影响，同时，制药企业还应当用从自身环境中分离出来的微生物来测定消毒剂对这些微生物的杀灭效果。 1　验证前的准备 1.1　考虑因素 验证工作要考虑的因素主要有：（1）基于消毒剂本身的消毒能力进行设计及评价；（2）基于生产和实验室环境真实生物负载进行设计及评价；（3）验证内容应包括消毒条件、方法、所用介质、消毒剂浓度、消毒时间、消毒剂的交替使用等；（4）选择合适的试验方案；（5）审计生产／供应商；（6）所有的规程、方法和结果均要形成文