医学检验实验课剖析.ppt

临床免疫学检查 中国医科大学一院检验科 实验内容： 乙型肝炎病毒(HBV)血清学标志物检查 HBsAg-乙型肝炎病毒表面抗原 HBsAb -乙型肝炎病毒表面抗体 HBeAg -乙型肝炎病毒e抗原 HBeAb -乙型肝炎病毒e抗体 HBcAb -乙型肝炎病毒核心抗体 实验要求： 掌握酶联免疫的检测原理 了解试剂盒的使用 掌握乙型肝炎病毒标志物检测结果的临床意义 实验原理： 酶联免疫检测（ELISA） ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。 它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。 此项技术自70年代初问世以来，发展十分迅速，目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。 ELISA是以免疫学反应为基础， 抗原、抗体的反应在固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行， 微孔对蛋白有很好的吸附作用，（试剂盒已经包埋好相应的抗原、抗体蛋白成分） 每加入一种试剂孵育反应后，多余的游离反应物可洗涤除去，从而保证试验结果的特异性与稳定性。 反应过程： 包被：将已知抗体或抗原通过物理吸附结合到固相载体表面使其固相化 抗原抗体反应：加入被检标本和酶标记物，使之与固相抗体或抗原发生免疫反应而被结合固定，经洗涤除去游离的酶标记物 酶促反应：加入酶底物，使之发生酶促反应而显色。 ELISA反应材料： 固相载体：聚