第九章毛细管电泳概览.docVIP

第九章 毛细管电泳 基本要求： 1. 理解毛细管电泳分离的原理； 2. 理解胶束电动毛细管色谱分离的基本原理； 3. 理解影响毛细管电泳与胶束电动毛细管色谱分离优劣的因素。 9.1 电泳基本原理 电泳指带电粒子在电场作用下作定向运动的现象。电泳有自由电泳和区带电泳两类，分析工作者感兴趣的是区带电泳。区带电泳是将样品加于载体上，并加一个电场。在电场作用下，各种性质不同的组分以不同的速率向极性相反的两极迁移，此时不考虑样品与载体之间的相互作用，因此电泳不是一个色谱分离过程。实际上，样品与载体之间总有一定作用力，人们就利用这种作用力，并与电泳过程结合起来，以期得到良好的分离。因此，电泳又称电色谱。区带电泳总是在固体或类固体这类载体上进行，常用载体有滤纸（故称纸电泳）、凝胶（故称凝胶电泳），以及醋酸纤维膜、淀粉、琼脂高聚物等。 图9-1 区带电泳设备示意图 电泳设备简单，操作方便。图9-1就是区带电泳设备的示意图。在左右两边的电解质贮槽中，放入合适的电解质溶液，载体架于两槽之间。电解液通常是一种缓冲液，浓度约0.1mol·L-1。电解液体积要大，以防止电解产物扩散至载体上，最好在浸入载体的电解液与插入电极的电解液之间有一隔板。载体上所加电压梯度为每厘米数十伏。高电压可以加速迁移，缩短分析时间，但电压梯度须增至每厘米数百伏。可将样品加入其载体一端的起始点。