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不同石榴品种抗寒性综合评价 　　摘要：以4个石榴品种的一年生枝条为试材，对其枝条抗寒性相关参数进行测定，应用隶属函数法对所测指标进行综合评价。结果表明：‘皮亚曼’、‘牡丹’、‘泰山红’和‘泰山三白’4个石榴品种在早春萌芽前枝条的半致死温度分别为-5.68℃、-5.46℃、-5.11℃和-4.85℃；新疆‘皮亚曼’和‘牡丹’石榴低温半致死温度较‘泰山红’和‘泰山三白’低；随着处理温度的降低，4个石榴品种枝条中相对电导率、MDA和POD活性逐渐升高，SOD和CAT活性呈先升高后降低的变化趋势；经综合隶属函数分析得到4个石榴品种的抗寒性顺序为‘牡丹’‘皮亚曼’‘泰山三白’‘泰山红’。 其中， ‘牡丹’和‘皮亚曼’石榴为中度抗寒品种，‘泰山三白’和‘泰山红’石榴为低度抗寒品种。 　　关键词：石榴；膜透性；保护酶；抗寒性 　　中图分类号：S665.403.4文献标识号：A文章编号：1001-4942（2014）02-0046-06 　　石榴（Punica granatum L.）适宜生长在温带及亚热带地区，性喜温畏寒，其适宜栽培区域受温度影响较大。在我国，石榴大田栽培的最北界是河北省保定市南部，石榴栽培区域很受限制。石榴冬季休眠期能耐-16℃以上的低温，在-17℃时会出现冻害，-20℃时大部分已冻死。因此，石榴的耐寒性是制约石榴生产发展的最关键因素之一，如何采取有效措施将冻害损失降至最低水平，是实际生产中迫切需要解决的问题。然而，目前对石榴抗寒性评价的研究甚少，仅靠大田冬季观察结果，难以得到准确的极限低温。因此，研究石榴抗寒性对石榴的生产具有现实的指导意义。 　　本试验测定了园地现有4个石榴品种的一年生枝条在不同低温条件下的抗寒性指标，并应用隶属函数法对所测指标进行综合评价分析，以确定4个石榴品种的抗寒性强弱及受冻害的程度，建立较全面的石榴抗寒性评价方法，为石榴生产中抗寒性品种选择及抗寒栽培管理提供理论依据。 　　1材料与方法 　　1.1试验材料 　　试验于2013年3月28日石榴萌芽前进行，采样时室外温度为3～6℃，材料取自山东省果树研究所试验基地。选取‘泰山红’、‘牡丹’、‘皮亚曼’和‘泰山三白’4个石榴品种的1年生健壮枝条，每个品种取30～40条迅速带回实验室 ，剪成8～10 cm的枝段分成5组，自来水洗净后吸干水分，蜡封两端放置在塑料袋中。将分组的枝条置于4℃冰箱预冷2天，后用控温冰箱（日本 SANYO公司）进行梯度冷处理，设置的温度梯度分别为0、-5、-10、-15℃ ，降温速度为 4℃/h，达到目的处理温度后维持12 h，后逐步升温，升温速度亦为 4℃/h，以4℃为对照。 　　1.2测定方法 　　将低温处理后的枝条分为两部分。一部分避开芽眼，剪成2～3 mm 的薄片，混合均匀，各称取1 g，放入具塞试管中，加入15 ml去离子水（含吐温-80），浸提1.5 h 后，测定溶液初电导率，试管盖塞后于100℃恒温水浴锅中煮 20 min，冷却至室温后，测定终电导率。 相对电导率的测定参考贺普超等[1]的方法；参考朱根海等[2]的方法拟合Logistic方程求出半致死温度。每处理重复3次。 　　超氧化物歧化酶（SOD）活性测定采用氮蓝四唑（NBT） 法[3]；过氧化物酶（POD）活性采用愈创木酚法；过氧化氢酶（CAT）活性采用过氧化氢法[4]；丙二醛（MDA）含量采用硫代巴比妥酸法[5]；可溶性蛋白采用考马斯亮蓝法；可溶性糖含量采用蒽酮法。上述各项测定均参考邹琦[4]的方法。 　　将每个温度处理后的枝条取15～20条，在20℃下进行水培，观察枝条萌芽情况。 　　1.3石榴抗寒性评价 　　3结论与讨论 　　3.1膜脂相变及膜脂过氧化与石榴抗寒性的关系 　　植物的抗逆性与生物膜密切相关，Lyons 1973年提出了“膜伤害”假说，认为生物膜随温度的降低而发生相变，植物正常生理状态时，需要液晶态膜状态，当温度降到一定程度时，一些膜脂由液晶态变为凝胶态，膜结合酶活力降低且膜透性增大，这些变化引起胞内离子渗漏，失去平衡，进而使代谢失调[7]。随处理温度的降低电解质的外渗增加，导致测得的相对电导率变大。相对电导率在一定程度上反映了膜脂的损伤程度，相对电导率与抗寒性呈负相关。试验低于0℃处理时，‘泰山三白’和‘泰山红’石榴的相对电导率均较‘牡丹’和‘皮亚曼’石榴高，表明后者抗寒性优于前者。 　　MDA 是膜脂过氧化作用的主要产物之一， 其含量可表示细胞膜系统结构和功能受害的程度[8]。植物遭遇逆境胁迫时， 活性氧积累对植物产生伤害的一个重要机制是直接或间接启动膜脂的过氧化作用，引起膜脂过氧化产物MDA的增加， MDA含量的变化在一定程度上反映了膜脂过氧化的程度，试验中随着处理温度的降低MDA含量逐渐升高，