一、实验目的 1. 学习和掌握细胞减数分裂CS标本的制片技术和方法 2. 熟悉减数分裂的全过程及各个时期CS的动态变化和形态特征 二、实验原理 减数分裂: 特殊的真核细胞分裂 ?连续两次核分裂—MⅠ MⅡ ?前期Ⅰ变化复杂;同源CS联会、片段互换 ?后期Ⅰ同源CS分离,数目减半 以动、植物雄性生殖分裂较为方便.在适当的时机采集花蕾(花序)或精巢,经适当技术处理,可在显微镜下观察细胞的减数分裂过程 三、实验材料、器具、药品试剂 大葱(Allium fistulosum, 2n=16)幼嫩花序 显微镜,载片,盖片,镊子,解剖针,吸水纸,铅笔,酒精灯等 卡诺固定液, 45%乙酸; 0.5%醋酸洋红,95%、70%乙醇 四、实验步骤 1. 取材 制片成败的关键因素 ?大葱: 伞形花序,顶生,两性花;春季花序嫩绿饱满、总苞光滑 ?蚕豆、玉米、百合、蝗虫 2. 固定 卡诺固定液: 12-24h 95%-80%-70%梯度乙醇依次漂洗5-30min 70%乙醇保存,4℃ 3. 剥取花药 摘取2-3个小花,置吸水纸上除去保存液(可用蒸馏水冲洗后再吸干,尤其是采用醋酸洋红染色法一定要将乙醇洗净) 解剖出的花药置洁净载玻片上;镊子挤出花粉母细胞,小范围内涂成薄层 4. 染色与压片 加一滴染液(不宜多),稍后将所有可见花药壁残渣清除干净 加盖片,吸去多余染液,拇指垂直紧压,使CS散开分布于同一平面
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