第十一章荧光法分解.ppt

* * 第 十 一 章 荧 光 分 析 法 1）光致发光：分子吸收某种波长的光后发射出比原来吸收光的波长更长的光的现象 荧光 磷光 2）荧光分析法：根据物质的荧光谱线的位置及其强度进行物质鉴定和含量测定的方法 优点：灵敏度高、选择性好 3）分类 分子荧光 原子荧光 紫外可见荧光 红外荧光 X射线荧光 第一节 荧光分析法的基本原理 一、分子荧光 （一）分子荧光的产生 1.分子的电子能级与激发过程 电子能级中包括振动能级和转动能级 电子能级多重性：M＝2s+1 s为总自选量子数 单重态S M＝1 自旋相反 三重态T M＝3 自旋相同 1）根据“能量最低原则”和“Pauli不相容原则”，基态时分子中的电子对填充在能量最低的轨道，且自旋相反，即总自旋量子数为0 2）激发态：电子对自旋相反，处于激发单重态电子对自旋相同，处于激发三重态，比激发单重态能量低 2.荧光的产生 过程1：吸收紫外可见光，基态电子跃迁到单重激发态的各个不同能级上。根据自旋禁阻选律不能直接跃迁到激发三重态的能级 过程2：激发态不稳定，释放能量返回基态 1）振动弛豫 激发态分子通过与溶剂分子碰撞而将部分能量传递给溶剂分子，电子由同一电子激发态的较高振动能级回到较低振动能级。10－12 2）内部能量转换 两个电子能级相差较小，振动能级部分重叠，电子由高电子能级转移到低电子能级的过程。图 3）外部能量转换 激发态分子与溶剂分子或其他溶质分子碰撞以热的形式释放能量。发生在第一激发态或激发三重态最低振动能级向基态转换的过程。 4）体系间跨越 不同多重态,有重叠的转动能级间的非辐射跃迁。改变电子自旋，禁阻跃迁，通过自旋—轨道耦合进行。图 5）荧光发射：电子由第一激发单重态的最低振动能级→基态（ 多为 S1→ S0跃迁），发射波长为 ? ’2的荧光； 10-7～10 -9 s 。由图可见，发射荧光的能量比分子吸收的能量小，波长长； ? ’2 ? 2 ? 1 ； 6）磷光发射：电子由第一激发三重态的最低振动能级→基态 （ T1 → S0跃迁）； 电子由S0进入T1的可能过程：（ S0 → T1禁阻跃迁） S0 →激发→振动弛豫→内转移→系间跨越→振动弛豫→ T1 发光速度很慢： 10-4～100 s 。 光照停止后，可持续一段时间。图 返回6 返回7 返回8 （二）荧光的激发光谱和发射光谱 1.激发光谱：表示不同激发波长的辐射引起物质发 射荧光的相对效率。记录 荧光 强度（F）与激发波长（λex） 的关系曲线 2.发射光谱（荧光光谱）：保持 激发光的波长在最大激发波长， 测定发射的荧光在各个波长的强 度，记录强度对发射波长（λem） 的关系曲线 3.溶液荧光光谱的特征 1）斯托克斯位移：发射波长总大于激发波长 2）发射光谱的形状与激发波长无关 电子跃迁到不同激发态能级，吸收不同波长的能量(如能级图λex2 ,λ1)，产生不同吸收带，但均回到第一激发单重态的最低振动能级再跃迁回到基态，产生波长一定的荧光(如λ‘2 )。 3）荧光光谱与激发光谱镜像关系 通常荧光发射光谱与它的吸收光谱（与激发光谱形状一样）成镜像对称关系 基态上的各振动能级分布与第一激发态上的各振动能级分布类似； 二、荧光与分子结构 1.分子产生荧光必须具备的条件 1）具有合适的结构； 2）具有一定的荧光量子产率。 荧光量子产率： 3)荧光寿命：除去激发光源后，分子的荧光强度降低到最大荧光强度的1/e所需要的时间 2.分子结构与荧光的关系 1）跃迁类型：π* →π的荧光效率高，系间跨越 过程的速率常数小，有利于荧光的产生； 2）共轭效应：提高共轭度有利于增加荧光效率 并产生红移 3）刚性平面结构：可降低分子振动，减少与溶剂的相互作用，故具有很强的荧光。如荧光素和酚酞有相似结构，荧光素有很强的荧光，酚酞却没有。 4）取代基效应：芳环上有供电基，使荧光增强。 三、影响荧光强度的外部因素 1.溶剂的影响 除一般溶剂效应外，溶剂的极性、氢键、配位键的形成都将使化合物的荧光发生变化； 2.温度的影响 荧光强度对温度变化敏感，温度增加，外转换去活的几率增加。 3. 溶液pH 对酸碱化合物，溶液pH的影响较大，需要严格控； 4.荧光熄灭剂－－荧光猝灭 1）定义：荧光物质分子与溶剂分子或其它溶质分子相互作用引起荧光强度降低的现象。 2）荧光熄灭剂：卤素离子、重金属离子、氧分子、硝基化合物、重氮化合物、羧基化合物等 3）机理：