猪肉中瘦肉精的检测——GC-MS法重点.ppt

猪肉中瘦肉精—克伦特罗的检测 制作人： 班级：食品1001班 学号：座机电话号码0114 目录 一、背景事件 二、概述 1、瘦肉精 2、克伦特罗 三、气相色谱-质谱联用法（GC-ＭＳ）检测克伦特罗 1、检测方法选择 2、实验具体方案 3、实验结果及分析 四、杜绝措施 五、参考文献 2011年3?15特别行动中，央视曝光了双汇“瘦肉精”养猪一事 。河南省孟州市等地养猪场采用违禁动物药品“瘦肉精”饲养生猪，有毒猪肉流入双汇食品中。 瘦肉精是一类动物用药，有数种药物被称为瘦肉精，例如莱克多巴胺（Ractopamine）及克伦特罗（Clenbuterol）等。将瘦肉精添加于饲料中，可以增加动物的瘦肉量、减少饲料使用、使肉品提早上市、降低成本。但因为考虑对人体会产生副作用，各国开放使用的标准不一。 2.1 在中国，通常所说的瘦肉精是指克伦特罗。其学名是盐酸克伦特罗，是一种平喘药。 结构简式： CAS号：37148-27-9 　　 分子式：C12-H18-Cl2-N2-O 　　 理化特性：白色或类白色的结晶粉末，无臭、味苦，熔点161℃，溶于水、乙醇，微溶于丙酮，不溶于乙醚。 2.2 人在食用超过盐酸克伦特罗残留限量的肉后会出现心率失常、酮症酸中毒或乳酸中毒、急性中毒症状如面色潮红、头痛、头晕、乏力、胸闷、心悸、骨骼肌震颤、四肢麻木等。 国家标准规定，每克肉中瘦肉精含量不能超过1纳克 。 1、检测方法选择 GC-MS法优点：把色谱高效快速的分离效果和质谱高灵敏度的定性分析有机合起来，能在多种残留物同时存在的情况下对某种特定的残留物进行定性、定量分析，而且具更高的检测极限。 GC-MS法与HPLC法相比，检测灵敏度更高，假阳性率更低，常用作筛选后阳性样品的确证。 2.1 分析方法 用C18小柱和聚（甲基丙烯酸－乙二醇二甲基丙烯酸酯）整体柱进一步富集净化，经N ,O-双三甲基硅烷三氟乙酰胺 BSTFA 衍生，选择离子监测方式进行气相色谱质谱测定。该方法以克伦特罗同位素 Clenbuterol-D9 为内标，内标法定量。 2.2 仪器与试剂 仪器：岛津GCMS-QP2010 Plus 高速离心机（转速可达到12000r/min以上） 漩涡混合器 超声波清洗器 氮吹仪 固相萃取装置 C18固相萃取小柱（100 mg, 3 mL） 混合型阳离子交换固相萃取柱 试剂： 盐酸克伦特罗（Clenbuterol，CLB）标准溶液1μg/mL 内标溶液（Clenbuterol-D9， CLB-D9）1μg/mL N , O-双三甲基硅基三氟乙酰胺（BSTFA） 甲醇 分析纯） 20 mmol/L 磷酸溶液 甲苯（分析纯） 2.3 分析条件 色谱柱：Rtx-5MS 30 m×0.25 mm×0.25 μm 进样口温度：220℃ 柱温程序：70℃ 0.6 min -25℃/min-220℃ 6 min -25℃/min-280℃ 5 min 恒线速度方式, 柱流量0.9 mL/min 不分流进样 检测波长：244nm 检测离子： CLB：检测 m/z 86, 187, 243, 262， CLB-D9：检测 m/z 95, 187, 262 以克伦特罗 m/z86 与内标峰 m/z 95 的峰面积比校准定量。 2.4 实验流程 3.1 盐酸克伦特罗的GC-MS 测定 图1 为衍生化克伦特罗和内标的质谱图，以克伦特罗碎片离子 m/z 86 与内标碎片离子 m/z 95 的浓度比值为横坐标，峰面积比值为纵坐标进行定量。 3.2 标准曲线 图2 为空白猪肉和添加2.5μg/kg 克伦特罗的猪肉样品提取液的离子流图，内标 Peak 1 和克伦特罗 Peak 2 的保留时间分别为9.83 min 和9.92 min, 空白猪肉样品在被测物及内标处均无干扰 相关性分析 分别添加不同体积的克伦特罗标准溶液 1 μg/mL 和50μL 内标溶液于2 g 猪肉样品中 其中克伦特罗的质量分别为1、5、10、20、40 和100 ng ，样品的处理方法如上所述。 以克伦特罗与内标的峰面积的比值对浓度比值进行线性回归，发现克伦特罗在0.5-50μg/kg 的浓度范围内，线性关系良好，相关系数大于0.999。 3.3 检测限及精密度 以信噪比的3倍和10倍分别计算检测限和定量限，方法检测限为0.13 μg/kg, 定量限为0.43μg/kg。该方法有较好的日内及日间精密度，在定量限附近，相对标准偏差小于20%（见表1），可满足分析要求。 表1. 克伦特罗的方法学数据 相关部门要对瘦肉精的流通进行严加监管，实行购买登记制度。 养牲畜者自律，监管人严格监督。 对责任人加大处罚力度，