生化期末复习分析.doc

变旋现象许多单糖，新配置的溶液会发生旋光度的改变，这种现象称为变旋。环状单糖或糖苷的比旋光度由于其α-和β-端基差向异构体达到平衡而发生变化，最终达到一个稳定的平衡值的现象。变旋现象往往能被某些酸或碱催化。由于单糖溶于水后，即产生环式与链式异构体间的互变，所以新配成的单糖溶液在放置的过程中其旋光度会逐渐改变，但经过一定时间，几种异构体达成平衡后，旋光度就不再变化，这种现象叫变旋现象。?例如在不同条件下获得的D（+）-葡萄糖，其比旋值不同。从低于30℃的乙醇中结晶的，熔点146℃，[α]D20=+112.2度，称为α－型；从98℃吡啶中结晶的，熔点148-155℃，[α]D20=+18.7度，称为β—型。这两种晶体分别溶于水中，放置一定时间后，其比旋达到同一恒定值，+52.6度。比旋是由于分子立体结构发生某种变化的结果。单糖的氧化氧化成醛糖酸：醛糖含游离醛基，具有很好的还原性。碱性溶液中重金属离子（Cu2+，Ag+，Hg2+或Bi3+等）如Fehling试剂（酒石酸钾钠，氢氧化钠和CuSO4）或Benedict试剂（柠檬酸，碳酸钠和CuSO4）中的Cu2+是一种弱氧化剂，能使醛糖（还原剂）的醛基氧化成羧基，产物称醛糖酸，金属离子自身被还原。能使氧化剂还原的糖称还原糖。所有的醛糖都是还原糖；许多酮糖也是还原糖，例如果糖，因为它在碱性溶液中能异构化为醛糖（2）氧化成醛糖二酸如果使用较强的氧化剂如热的稀硝酸，醛糖的醛基和伯醇基均被氧化成羧基，形成的二羧酸称醛糖二酸或糖二酸，例如β-D-葡萄糖被氧化成D-葡糖二D-和L-葡萄糖经硝酸氧化，得到相应的D-和L-葡糖二酸，它们也可以分别从L-和D-古洛糖氧化获得；D-和L-甘露糖也分别给出有光学活性的甘露糖二酸；但D-和L-半乳糖给出同一的半乳糖二酸，也称粘酸，它是一个无光学活性的内消旋化合物，分子内存在一个对称面。 这一组共有8种氨基酸。4中带有脂肪烃侧链的氨基酸，即丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸；两种含芳香环氨基酸：苯丙氨酸和色氨酸；一种含硫氨基酸和一种亚氨基酸，脯氨酸。这组氨基酸在水中的溶解度比极性R基氨基酸小。这组氨基酸中以丙氨酸的R基疏水性为最小，它介于非极性R基氨基酸和不带电荷的极性R基氨基酸之间。 通过两种方式可以进行酶活力测定，其一是测定完成一定量反应所需的时间，其二是测定单位时间内酶催化的化学反应量。测定酶活力就是测定产物增加量或底物减少量，主要根据产物或底物的物理或化学特性来决定具体酶促反应的测定方法。（1）分光光度法：利用底物和产物在紫外或可见光部分的光吸收的不同，选择一适当的波长，测定反应过程中反应进行的情况。这一方法的优点是简便、省时间和样品，可检测到nmol╱L水平的变化。该方法可以连续的读出反应过程中光吸收的变化，已成为酶活力测定中一种最重要的方法。几乎所有的氧化还原酶都可以用此方法测定。由于分光光度法有其独特的优点，因此把一些原来没有光吸收变化的酶反应，可以通过与一些能引起光吸收变化的酶反应偶联，使第一个酶反应的产物，转变成为第二个酶的具有光吸收变化的产物来进行测量。（2）荧光法：主要是根据底物或产物的荧光性质的差别来进行测定。由于荧光方法的灵敏度往往比分光光度法要高若干个数量级，而且荧光强度和激发光的光源有关，因此在酶学研究中，越来越多的被采用，特别是一些快速反应的测定方法。荧光测定方法的一个缺点是易受其他物质干扰，有些物质如蛋白质能吸收和发射荧光，这种干扰在紫外区尤为显著，故用荧光法测定酶活力时，尽可能选择可见光范围的荧光进行测定。（3）同位素测定方法用放射性同位素的底物，经酶作用后所得到的产物，通过适当的分离，测定产物的脉冲数即可换算出酶的活力单位。该方法的优点是灵敏度极高，可达fmol或更高水平。已知六大类酶几乎都可以用此方法来测定。通常用于底物标记的同位素有3H、14C、32P、35S和131I等。（4）电化学方法PH测定法，最常用的是玻璃电极，配合一高灵敏度的pH计，跟踪反应过程中H+变化的情况，用PH的变化来测定酶的反应速率。也可以用恒定PH测定法，在酶反应过程中，所引起的H+的变化，用不断加入碱或酸来保持其pH恒定，用加入的碱或酸的速率来表示反应速率。用此方法可以测定许多酯酶的活力。另外还使用离子选择电极法测定某些酶的酶活力，用氧电极可以测定一些耗氧的酶反应，如葡糖氧化酶的活力就可以用这个方法方便的测定。 此外还有一些测定酶活力的方法，例如旋光法、量气法、量热法和层析法等，但这些方法使用范围有限，灵敏度较差，只是应用于个别酶活力的测定。8、许多DNA是双链环状分子，如细菌染色体DNA、质粒DNA、细胞器DNA、某些病毒DNA等。细菌染色体DNA太大，很难分离出完整的DNA分子。但可以提取到相对分子质量不太大的天然环状