HCV受体的研进展.docVIP

丙型肝炎病毒受体的研究进展 第四军医大学微生物学教研室 吕欣 综述 薛小平 徐志凯 审校 摘要： 丙型肝炎病毒（HCV）受体一直是HCV研究的热点之一， 但至今仍无定论，已经提出的可能受体有：CD81、低密度脂蛋白受体、粘多糖、清道夫受体及C型（钙离子依赖型）凝集素DC／L－SIGN等，本文就上述与HCV相关分子的研究进展作一综述。 HCV是引发慢性肝炎的主要病原体之一，并有可能进一步发展成为肝硬化与肝癌，初步估计全世界约3%的人感染HCV。HCV的天然宿主只有人和黑猩猩，而且至今没有确立一株HCV 的敏感细胞系可以支持HCV在体外长期有效的复制，从而制约了HCV的相关研究。对有囊膜病毒而言，病毒囊膜糖蛋白与宿主细胞膜上特定分子的结合，是引发宿主受病毒感染的始动因素，受体决定了病毒的组织和细胞亲嗜性以及宿主范围。有关病毒受体的研究，已经成为当今基础病毒学和分子病毒学研究中最为活跃的领域之一。1998年Pileri等报道HCV 包膜糖蛋白E2 与人CD81分子结合，HCV的中和抗体在体外可以抑制病毒与CD81结合，推断CD81分子可能是HCV的受体[1]。在随后有关HCV受体的研究中，相继提出低密度脂蛋白受体、粘多糖、清道夫受体等作为HCV的候选受体。但迄今为止，HCV对宿主细胞的侵染机制尚无清楚的了解，而且意见不一。本文对近几年有关HCV 受体研究的进展作一综述。 1. CD81 CD81的结构与功能：CD81是膜相关蛋白，又称增殖抗体的靶抗原－1（TAPA-1），含有236个氨基酸，约26KD，属于四次跨膜超家族(TM4SF)。N端、C端均在胞浆内，四次跨膜形成2个疏水的细胞外环：EC1（SEL），EC2（LEL），各有28和80个氨基酸。CD81分布广泛，除中性粒细胞、血小板和红细胞外，在B细胞、T细胞、巨噬细胞、NK细胞、树突状细胞与嗜酸性粒细胞上都有表达。CD81在B细胞上与CD21、CD19、Leu13组成细胞信号转导复合物，通过抗原特异性识别和CD21介导的补体识别降低B细胞的活化阈值，还与MHCⅠ类分子、Ⅱ类分子、CD20、CD37、CD53、CD82等分子共价相连；在T细胞上CD81与CD4、CD8、CD82相连。影响多种细胞的粘附、激活、增值、分化及形态改变［2］。EC2是HCV E2与CD81的结合识别区，其中4个Cys形成的2个二硫键，对E2－CD81结合是必要的［3］。 1.2 CD81 与HCV 的相互作用：E2蛋白的C末端有一疏水序列，此区对E2蛋白具有膜锚定作用。删去此疏水区（C末端至少31个氨基酸）能够产生分泌型、可溶的E2 蛋白。分泌型E2 蛋白155、163、169、180和196），但绢猴并不是HCV的易感动物。随后Allander等［12］也报道了相似的研究结果，并同时发现E2与AGM CD81是有低亲和力的。这足以表明HCV E2与CD81的结合并不仅限于人与黑猩猩，预示着这种结合对HCV的易感性可能不是必需的；（4）在目前建立的HCV短期培养细胞系中，人肝癌细胞系HepG2 细胞和蚊AP61细胞表面不表达CD81，但可以与HCV E2结合，转染CD81的HepG2细胞中HCV的感染量与非转染细胞相近[13，14］。（5）已经构建了表达人CD 81 分子的转基因鼠，但是这些转基因鼠没有获得HCV的易感性[15]。而在其他病毒的研究中，获得相应受体分子的转基因动物，即可成为该病毒的易感动物模型，如表达麻疹病毒受体CD46的转基因鼠对麻疹病毒易感［16］，表达HIV受体CD4及辅受体CCR5的转基因鼠支持HIV-1在体内的复制［17］。此外， CD81介导HCV内化的作用差，使用纯化的抗CD81mAb（该单抗与CD81的结合位点和E2与CD81的结合位点相同）与人B细胞上CD81反应，12小时后仅30％CD81被下调，而CD4与特异性抗体反应30-60分钟后，就有50-80％的CD4从细胞表面消失[3]。现在还不能确定，这种低效的内在化作用是否可以满足HCV对宿主建立长期有效的感染。如果存在其他受体，HCV对肝细胞的结合就不完全依赖于CD81，有可能CD81只承担吸附受体的作用，而病毒的穿入则由其他分子介导。低密度脂蛋白受体（LDLR）就是继CD81后提出的一种介导HCV内吞进入宿主的特异性受体。 现有的研究报道大部分是建立在CD81与E2单独作用的基础上的。Owsianka 等研究认为，可溶性的E2是无法完全模拟天然E2结构的，多种针对E2不同区段的特异性单抗对3种形式E2（可溶性、全长E1－E2复合体和病毒样颗粒）与CD81结合的抑制效应不同［18］；最近又有实验证明，E2与CD81的结合是株特异性的，HVR1与HVR2相互作用调节与受体的结合［19］。因此选择合