5.分子发光法技术方案.ppt

第5章  分子发光分析法 Molecular Luminescence Analysis 第5章 分子发光分析法（Molecular Luminescence Analysis） 分子吸收能量，电子由基态进入激发态，当电子由激发态返回基态时发射光谱 M+能量→M＊ →M+热量 →M+ h? ′+热量 光子 —— 光致发光 M+ h? →M ＊ 阴极射线—— 阴极射线发光 荧光 磷光 X 射线—— X 射线发光 F P 热—— 白炽发光 寿命10-7—10-9s 10-3—10s 超声波—— 声纳发光 离子流—— 离子发光 化学反应能——化学发光 M+化学能→M＊ 第5章 分子发光分析法（Molecular Luminescence Analysis） 第一次记录荧光现象 1575 西班牙内科医生、植物学家 荧光是光发射概念、引入荧光术语 1852 Stokes 观察奎宁、叶绿素 提出用荧光作为分折手段 1864 Stokes 第一个实际应用、铝一桑色素荧光测 1867 1965以来, 荧光光谱兴趣激增，生物化学家利用它的高灵敏度。二十世纪七十年代后期，引起国内学者注意 第5章 分子发光分析法（Molecular Luminescence Analysis） 15-1??? 光致发光及影响荧光发射因素 15-2?? 荧光分析法 15-3 ? 磷光分析法 15-4 化学发光分析法 15-5 光化学传感器 第5章 分子发光分析法5-1??? 光致发光及影响荧光发射因素 荧光 涉及吸收和发射两个过程 1、激发态 基态 激发态 分立轨道上 ?﹡ ↑ ↑ ↓ 非成对电子 平行自旋更 n ↑↓ ↑↓ ↑↓ ↑↓ 稳定 ? ↑↓ ↑↓ ↑↓ ↑↓ ?→?﹡ n→?﹡ 净电子自旋 S 0 S 0 S 1 分子重态 M 2S+1 1 （跃迁几率很小） M 2S+1 3 单重基态 S0 激发单重态 S 激发三重态 T 电子从 S0 到 S 分子能量相应增加改变了分子对称性、 分子净的电子自旋（多重性）可能改变 第5章 分子发光分析法 5-1??? 光致发光及影响荧光发射因素 2、去活化过程 溶液中： 10-14-10-12 s 10-13-10-11 s 10-2-10-6 s 振动弛豫 内部转换 体系间的跨越 （发生在相同多重度间） （发生在不同多重度间） S2 S1 T1 ＜S1 T2 10-15 s A1 A2 F P 磷光发射 10-2-10 s 基态 S0 荧光发射 外部转换 10-7-10-9 s 发生在不同电子能态间 （熄灭） 第5章 分子发光分析法 5-1??? 光致发光及影响荧光发射因素 2、去活化过程 注意点 1 气相分子中易观察到以发射光子方式失去振动能 2 实现内部转换 a. S1，S2 电子能级差小 、易实现。 b. S1，S2 振动能级的位能面有交叉 3 体系间跨越的必要条件 电子自旋与磁场微扰耦合 a. S1、T1位能面在某处有容易达到的能量相交 激发态电子自旋反转， b. 微观磁场的微扰存在 分子多重态变化 产生 Br-,I-,CH3I…重原子分子 ●带电粒子的极性分子或可极化分子易产生磁效应 或离子外层电子云疏松 ●顺磁性分子 O2…外层3d5五个电子不成对 内 4 外部转换使发光熄灭现象 重原子效应 T1 →S0 比 S1 → S0 可能性更大 外（溶剂） 5 去活化众多过程中，以速度最快、激发寿命最短的途径占优势，相互竞争。 第5章 分子发光分析法 5-1??? 光致发光及影响荧光发射因素 ３、荧光的一些基本问题 a. 荧光类型 1 从寿命 ● 瞬时荧光 ～10-8s 内发射 分析中有意义! S1→S0+ hν S1+S0 ? S1 S0 ﹡→2S0+ hν 受激准分子 ● 迟滞荧光 波长同瞬时荧光，寿命与磷光相似 刚性、粘稠介质中 E型 T1+ 活化能 →S1→S0+ hν P 型 T1 + T1 → S1 + S0 三重态——三重态粒子湮没 S0+ hν 寿命为相随磷光寿命的 1/2 复合 重组）A ? + hν 1 →A﹡ ↑↓ + hν 2 →A.+ ↑ +e 重组↓+e A ? + hν 3 ←A﹡ ↑↓ 第5章 分子发光分析法 5-1??? 光致发光及影响荧光发射因素 ３、荧光的一些基本问题 a. 荧光类型 2 激发光与荧光波长比较 ●Stokes荧光（溶液中） λ荧＞λ激 可能 ●Antistokes荧光（高温稀薄气体中） λ荧＜λ激 ●共振荧光（气体、晶体