植物内生菌分离理方法.docVIP

d植物内生菌分离处理方法 文献 材料 前处理 第一次消毒 第二次消毒（含三消） 处理 对照 培养基 刘明志，2011 南方红豆杉的老树皮、幼茎、叶 截成2～3 cm长的小段，去除树皮层 75%酒精中浸泡30 s 0．1%升汞溶液浸泡8 min，无菌水冲洗3～5次 研磨成匀浆液，倾倒于PDA上 切成0．5 cm左右的块，接种于有100 mg L－1青霉素和链霉素的PDA固体培养基表面。每皿10块 刘金花 2011 黄花蒿的根，茎，叶 叶切成1cm2,茎和叶切成1cm左右小段（两端皆有切口） 将根，茎，叶一次用75%酒精浸1min 1%的次氯酸钙溶液浸泡1min,用无菌水冲洗5次 置于含双抗的VA培养基平板培养 待切口处长出菌落后转至PDA培养基进行内生真菌的分离 宋培勇 2011 珙桐茎、叶和叶柄 将采集的新鲜珙桐的茎、叶和叶柄分 别用流水冲洗, 风干表面水分, 剪成小块或小段, 无菌水漂洗 2 次 75%酒精浸泡 1 min 再用 2% NaClO 溶液中浸泡 3 min, 转入 75%酒精中浸泡 30 s, 接着用无菌水漂洗 3 次, 将组织块在研钵中充分研磨成匀浆 最后一次冲洗液涂 3种不同培养基平板, 26~ 28e 下培养2~ 3d, 筛选出最佳消毒时间和培养基, 将表面消毒彻底棉花根部切块放入灭菌研钵中用无菌水冲洗 4次,取上清液涂抹于培养基上。以无菌