紫外分光光度计测定咖啡因含量(育英).pptVIP

紫外分光光度计测定咖啡因含量 　咖啡因又称咖啡碱,化学名为1 ,3 ,7 - 三甲基苯嘌呤. 咖啡因是可可类食品及饮料,茶叶中含有的嘌呤类生物碱,它溶于水、醇、氯仿、二氯甲烷等溶剂. 咖啡因也是多数药物含有的成分,它能促进血液流通,扩张血管,并且有利尿,兴奋中枢神经等功能. 因此,食用含咖啡因的食品或药物有利于治疗各种水肿病. 咖啡因的含量是可可类食品,饮料和茶叶的一个重要品质指标,测定它的含量一直受到分析工作者的广泛关注. 实验原理 咖啡因在273nm处有最大光值,因此选择273nm作为咖啡因的检测波长. 由于273nm在紫外光范围内,因此要使用紫外分光光度计,并且要使用石英比色皿. 实验目的: 学会使用紫外分光光度计; 学会三种样品的预处理; 一、咖啡因标准曲线绘制: 从无水乙醇为溶剂的咖啡因储备液 c 500. 0μg/ mL 中移取适量标准品于6个50 mL 容量瓶中用水定容,得到浓度 为2. 00 ,4. 00 ,6. 00 ,8. 00 ,10. 00 ,12.00μg/ mL 的系列标准溶液. 在紫外分光光度计上测其在273 nm处的吸光度A ,得标准曲线 0p 上述三份样品溶液分别进行干过滤（即用干漏斗、干滤纸过滤），弃去前过滤液，取后面的过滤液，上分光光度计测定。 结果: 1、请写出标准曲线，相关性，及线性范围； 2、算出样品中咖啡因含量（ug/ml或ug/g 注意: 分光光度计最佳的读数范围:0.2~0.7； 样品中咖啡因含量比较高，根据实际情况，稀释一定倍数后再测。 标准曲线用讲台上的Excel现场作，要求相关性达到0.999以上。 * * 二、样品预处理: （1）将25mL可口可乐置于一100mL洁净、干燥的烧杯中，于电炉上加热15min，以赶尽可乐中二氧化碳。 （2）准确称取0.1g速溶咖啡，用20mL蒸馏水煮15min，冷却后待用。 （3）准确称取0.1g茶叶，用20mL蒸馏水煮沸10min，冷却后，取上层清液，转移到容量瓶中;并按此步骤再重复一次。 将上述三种样品分别转移至50mL容量瓶中，并定容至刻度。 *