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  • 2016-10-06 发布于贵州
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ImageLa中文操作手册

Image Lab? 中文操作手册 Fast and Reliable Image Lab全自动图像获取和分析软件用于Molecular Imager ChemiDoc? XRS+、Molecular Imager Gel Doc? XR+ 和 Criterion Stain FreeTM 成像系统,可应用于凝胶电泳和转印膜的数字成像和分析,而自动化的工作流程能加速图像获取步骤及参数优化,并针对调整好的凝胶或转印膜影像进行系统性分析,进而得到所需的分析数据结果。 一、软件操作 1. 主窗口工具列 档案管理 分析数据Results Data 2. 显示工具列 3. 分析工具列 (1)工具(Image Tools) (2)及条带工具(Lane and Band Tools) (3)分子量工具(MW Molecular Weight) (4)自动定量工具(Quantity Tools) (5)注释工具(Annotation Tools) (6)手动定量工具(Volume Tools) 二、使用Image Lab 软件进行化学发光取流程 1. 建立像取: 在(Gel Imaging)对话框中选择Chemi(化学发光)应用程序 在区域(Imaging Area)对话框中的下拉式选单中选择合适的样品大小(非必需) 选择曝光(Image Exposure)方法,可以评估曝光时间并以手动设定(Manual Exposure),或是使用信号累积模式(Signal Accumulation Mode,SAM)来进行。 在建立一个化学发光的程序时最难的任务就是图像曝光的确定,因为您想获得一个充分利用了相机大的动态范围的图像。过短的图像曝光时间可能使高于膜背景的微弱信号不能被识别;过长的图像曝光时间能够使得某些条带饱和(也就是说,超出了相机准确报告信号的能力)。如果这是您第一次用ChemiDoc XRS+分析化学发光样品,您需要在使用手控或信号累积模式(SAM)之前决定一个合适的成像时间框架。获得这个信息的最好的方式是取得一个相对短的手工曝光并利用Image Lab里的工具估计最适的曝光时间。 2. 手动曝光 选择手动设定曝光时间(Manually set exposure time)并在读秒框中输入10秒。 选择Highlight saturated pixels 。 把胶置于透射箱的中心位置。 在程序窗口中点击按钮。 观察显示器中样品的实时像,打开照胶系统的门并移动样品直到位于视野的中心区域。 可利用照相机的变焦滑板调节区域的大小。 选择按钮。 若所需的像出现在计算机的显示器上,确认像中是否包含红色的饱和区域。若有饱和区域存在,请重新以较短的曝光时间来取像。若无饱和区域存在,则可移动鼠标置于最暗的条带之上,在较低的右下角Image Lab窗口中观察信号的强度数值。如图中显示强度为1994,照相机能记录的最大值的32分之一(最大值为65,535)。用你的最初的10秒曝光再乘以30就可在照相机的最大动态范围附近你的样品。若你只需针对单一像的时间进行评估,可直接在手动曝光区域中输入300。 3. 信号累积模式(Signal Accumulation Mode,SAM) 如果预估方法不足以精确满足您的目的,请选择SAM按钮,然后按Setup按钮。一个新的对话框会跳出来,其包含有可输入细分的成像时间的领域。 在这个例子中,我们已经输入了小于和大于我们原始的300秒曝光估计时间,因为我们有理由相信准确的成像时间将会在这些时间之中。我们总共想要5个成像,推测其中一个将会与最佳成像极为接近。一个您的SAM设定的图像显示出现在对话框里。 而SAM设定的影像显示对话窗口,在您选择按钮后再点选按钮,窗口会显示相关进度图标来说明整体像取的时间。在250秒取第一个像,同时小缩图会出现在窗口的下方,以此类推整个过程将持续到取所有的像。 就像前面做过的那样,通过移动鼠标在图像上,您能判定强度值。您也可以通过使用位于程序窗口左边的图像转换窗口(Image Transform)中的调节划片改变图像的表观。在SAM程序中的任何地方您都能通过点击缩略图查看图像。若确定调整到符合您要求的像时,点击 按钮舍弃其它不适合的像来完成取像的程序。也可在SAM取像的过程中或之后来保存需要的像,直接点选右键单点缩图窗口内的像即可进行存盘保留下来。SAM图像会导致背景信号的平均。当较多的图像被获得时,在背景强度水平附近的弱的信号将会变得难以识别。如果辨别最弱的信号很重要,我们推荐在合适的时间下获得单一的成像。 三、建立分析(C

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