恩诺沙星检验SOP.docVIP

GMP管理文件 题 目 恩诺沙星检验标准操作规程 制 定 审 核 批 准 制定日期 审核日期 批准日期 颁发部门 颁发数量 生效日期 分发部门 文件编码 共 4 页 第 1 页 一、目 的：建立恩诺沙星检验的标准操作规程，保证正确操作。 二、依 据：《中国兽药典》（2000年版一部） 。 三、适用范围：适用于恩诺沙星的检验。 四、责 任 者：QC检验员 五、正 文： 1．质量标准：（见恩诺沙星质量标准）。 2．试剂： 2.01 稀醋酸 2.02 碘化铋钾试液 2.03 丙二酸 2.04 醋酐 2.05 氢氧化钠溶液（0.1mol/L） 2.06 醋酸乙酯 2.07 正丁醇 2.08 冰醋酸 2.09 氟喹啉酸对照品 2.10 乙腈 2.11 磷酸溶液 2.12 高氯酸滴定液（0.1mol/L） 2.13 橙黄Ⅳ指示液。 3．仪器与用具 3.01 紫外分光光度计 3.02 三用紫外分析仪 3.03 高效液相色谱仪 3.04 干燥器 3.05 电热干燥箱 3.06 电阻炉 3.07 电子天平 3.08 酸式滴定管 3.09 硅胶GF254薄层板 4．操作步骤： 4.1 性状 本品为微黄色或淡橙黄色结晶性粉末；无臭，味微苦；遇光色渐变橙红色。 本品在氯仿中易溶，在二甲基甲酰胺中略溶，在甲醇中微溶，在水中极微溶解； 题 目 恩诺沙星检验标准操作规程 共 4 页 第 2 页 在氢氧化钠试液中易溶。则判定该项合格。 熔点 取供试品，照熔点测定法（详见熔点测定法标准操作规程）测定，熔点应为221～226℃，则判定该项合格。 4.2 鉴别： 4.2.1 取本品约50mg，加稀醋酸10ml，使溶解，加碘化铋钾试液数滴，即生成橘红色沉淀。 4.2.2 取本品约50mg，置干燥的表面皿中，加丙二酸约50mg与醋酸1ml，在水浴上加热5～10分钟，即显红棕色。 4.2.3 取本品，加0.1 mol/L氢氧化钠溶液制成每1ml中约含5μg的溶液，照分光光度法（详见紫外分光光度法检验标准操作规程）测定，在271nm、322nm和334nm的波长处有最大吸收。 4.2.4 本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱一致。（委托检验） 4.2.5 结果判定：上述 1 2 应呈正反应（3）（4）应符合规定，则判定该项合格。 4.3 检查 4.3.1 氟 取本品约40mg，精密称定，照氟检查法测定（详见氟检查法标准操作规程），按干燥品计算，含氟量不得少于5.0%，则判定该项合格。 4.3.2 氟喹啉酸 取本品，加0.1mol/L氢氧化钠溶液溶解并制成每1ml中约含10mg的溶液，作为供试品溶液；另取氟喹啉酸对照品，加0.06 mol/L氨溶液制成每1ml中约含0.1mg的溶液，再将此溶液加水制成每1ml中约含0.01mg和0.02mg的溶液，作为对照品溶液（1）和对照品溶液（2）。照薄层色谱法（详见薄层色谱标准操作规程）试验，吸取上述3种溶液各5μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以醋酸乙酯-正丁醇-冰醋酸-水（50：9：25：15）为展开剂，直立展开，晾干约15分 钟，置紫外光灯（254nm）下检视。供试品溶液如显与对照品溶液相同的杂质斑点，其颜色与对照品溶液（2）的主斑点比较，不得更深，则判定该项合格。 4.3.3 环丙沙星 照高效液相色谱法（详见高效液相色谱法标准操作规程）试验。用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-磷酸溶液（0.025mol/L的磷酸溶液用三乙胺调节pH值至3.0）（13：87）为流动相；检测波长为278nm。理论板数按恩诺沙星峰计算应不低于1500.取本品与恩诺沙星对照品，分别加流动相溶液并制成每1ml中 题 目 恩诺沙星检验标准操作规程 共 4 页 第 3 页 约含0.5mg的溶液，作为供试品溶液和对照品溶液（1）；另取盐酸环丙沙星对照品，加流动相溶解并制成每1ml中含0.2μg的溶液，作为对照品溶液（2）。精密量取上述供试品溶液和对照品溶液（1）（2）各50μl，注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍。供试品溶液的色谱图中如出现与对照品溶液（2）g）； W2为称量瓶与供试品恒重的重量（g）； W0为称量瓶恒重的重量（g）。 4.3.5 炽灼残渣 取本品1.0g，置已炽灼至恒重的坩锅中，精密称定。待炽灼至完全灰化，放冷至室温，加硫酸0.5～1ml使湿润，低温加热至硫酸蒸汽除尽后，在700～800℃炽灼，使完全灰化，移置干燥器内放冷至室温，精密称定后，再在700℃－800℃炽灼至恒重。计算。炽灼残渣不得过0.2％，则判定该项合格。 计算公式：