酶标仪应用总结1-吸收光检测.pptVIP

生物大分子定量 Absorbance 260 nm Absorbance 280 nm 生物大分子定量 核酸定量（A260） 原理：核酸的嘌呤和嘧啶环含有共轭双键，对260nm左右的紫外光有较强的吸收；通过测量260nm的吸光值可计算出DNA、 RNA、寡聚核苷酸的浓度。 检测实验： 260/280 Ratio Test Direct dsDNA Quantitation Direct Oligonucleotide Quantitation Direct RNA Quantification Particulate Test A320 Phenol Test EDTA Inhibition Assay 核酸定量定量（A260） 260/280 Ratio Test： 用于评估样品的纯度，因为蛋白的吸收峰是 280 nm。纯净的样品，纯的DNA A260/280比值为 1.8 ；纯的RNA A260/280比值为 2.0 。样品中如含有杂蛋白及苯酚，A260/A280比值即明显降低。 对于纯的核酸溶液，测定A260，即可利用核酸的比吸光系数计算溶液中核酸的量，通常以1OD值相当于50μg／mL双螺旋DNA，或40μg／mL单螺旋DNA（或RNA），或20μg／mL寡核苷酸计算。 Particulate Test A320：检查经纯化