基因工程的基本操作导论.doc

基因工程的基本操作程序 目标的获取 从基因文库，PCR扩增，人工合成 载体构建 目的基因启动子终止子和标记基因 目标导入 目的基因进入受体细胞内 检测鉴定 基因探针法，生物学水平鉴定等 1 ??人工合成 ??技术比较 2 ??组成 ??功能 ??步骤 3 ??转化 ??受体种类 ??导入方法 4 1目标获取编辑 从基因文库中获取基因文库：将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入受体菌的群体储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因，称为基因文库。 基因文库的种类：1、基因组文库；2、部分基因文库。 利用PCR技术扩增目的基因 PCR含义：是一项在生物体外复制特定DNA片段的核糖合成技术。全称是多聚酶链式反应。 PCR原理：DNA双链复制。 前提条件：有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物。 扩增过程：目的基因DNA受热变性后解链为单链，引物与单链相应互补序列结合，在DNA聚合酶的作用下进行延伸，如此重复循环多次。 结果：每次循环后的目的基因的量增加一倍，即成指数形式扩增。 如果基因较小，核苷酸序列又已知，可以通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成。 　 DNA复制 PCR技术 基因克隆 场所 细胞核 生物体外 细胞内 酶 解旋酶、DNA聚合酶 Taq酶 限制酶、连接酶 载体 不需要 不需要 需要 遵循原则 碱基互补配对 碱基互补配对 碱基互补配对