第4章蛋白质的稳定性和稳定化分析.pptVIP

第四章 蛋白质的稳定性和稳定化 生命科学学院: 柯德森 Desenke@21 QQ270820679 研究意义: 了解蛋白质稳定性与结构的关系是理解蛋白质分子自我装配过程的关键. 研究蛋白质稳定性机制是实现酶工程研究目标的重要基础. 第一节: 蛋白质的稳定性 一. 蛋白质稳定性的分子原因 蛋白质的稳定性: 蛋白质抵抗各种因素的影响,保持其生物活力的能力. 蛋白质的特定功能是由其特定的空间结构决定的,要保持其生物活力,必须保持其空间结构,稳定蛋白质空间结构的因素是什么? 理解蛋白质 稳定性的概念? 维持蛋白结构稳定的主要因素: 金属离子、底物、辅因子和其他相对低分子质量配体的结合作用 蛋白质-蛋白质和蛋白质-脂的作用 盐桥和氢键 二硫键 对氧化修饰敏感的氨基酸含量较低 氨基酸残基的坚实装配 疏水相互作用(思考题) 疏水性标尺 疏水性氨基酸越多越稳定? 疏水性与蛋白质稳定性的关系小结 疏水性大小与稳定性没有必然的联系 非极性氨基酸在蛋白质球体内的规则的排列是稳定性的原因之一 增加疏水作用是稳定蛋白质的实用方法:降低蛋白质表面的疏水性,增加蛋白质内部的疏水性 二. 测定蛋白质稳定性的方法 比较蛋白质稳定性的准则包括: 熔化温度Tm;蛋白质伸展一半时的变性剂浓度 蛋白质自由能; 最大稳定性温度(Ts); 在特定温度下蛋白质功能活性维持时间. 思考 熔化温度Tm和蛋白质伸展50