枯草芽孢杆菌对黄河鲤鱼生产性能及消化酶活性的影响.docVIP

枯草芽孢杆菌对黄河鲤鱼生产性能及消化酶活性的影响 　　摘要：为研究枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）对黄河鲤鱼（Cyprinus carpio）的生产性能、肠道及肝胰脏消化酶活性的影响，将黄河鲤鱼随机分为5组，分别饲喂含0（对照组）、0.1‰、0.2‰、0.3‰、0.4‰枯草芽孢杆菌的日粮，试验期为60 d。结果表明，鱼体摄食枯草芽孢杆菌后消化道的消化酶活性关系为：食糜中肠组织肝胰脏。黄河鲤鱼饲料中枯草芽孢杆菌（有效活菌数为2×109 CFU/g）的适宜添加量为0.2‰～0.3‰。 　　关键词：黄河鲤鱼（Cyprinus carpio）；枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）；生长性能；消化酶；活性 　　中图分类号：S948；S965.116 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2013）10-2380-03 　　随着水产养殖集约化程度不断提高，水体富营养化、农药残留、病原微生物抗药性等问题相继出现将严重影响食品安全。微生态制剂因具有无残毒、无抗药性、不污染环境等优点，并具有改善养殖动物消化道有益菌群、抑制或杀死有害菌[1]、提高动物免疫力[2]、促进动物生长及消化[3]、提高动物的健康水平等功能，在水产动物营养与饲料领域受到广泛关注。枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）是常用的微生态制剂，既可以改善水质[4]，又可以产生多种酶类[5]，并且能够产生芽孢而耐高温高压，在饲料加工过程很少失活，被广泛应用于水产饲料添加剂中。近年来，有关枯草芽孢杆菌应用于水产动物生产性能及消化酶活性的研究较多[6-9]，但目前尚未见到关于枯草芽孢杆菌对黄河鲤鱼（Cyprinus carpio）生长性能及消化酶活性影响的研究报道。本研究通过在黄河鲤鱼饲料中添加枯草芽孢杆菌，研究其对黄河鲤鱼的生长及消化酶活性的影响，以期为黄河鲤鱼健康养殖和枯草芽孢杆菌在黄河鲤鱼饲料中的合理利用提供科学依据。 　　1 材料与方法 　　1.1 试验动物与饲料 　　黄河鲤鱼购自河南省引种育种中心，初始体重为（25.27±0.27） g，分置于郑州牧业工程高等专科学校水产实验室容积为90 cm×45 cm×50 cm的15个玻璃水族箱中，水深30 cm。养殖系统为室内循环水系统，包括丝棉、砂滤、活性炭过滤等，流速为2～3 L/min，溶氧量、氨氮量和温度分别为（8.20±0.90） mg/L、（0.03±0.02） mg/L和22～24 ℃。饲料选用郑州启元饲料科技有限公司生产的鲤鱼全价配合颗粒饲料001#，不含枯草芽孢杆菌，其主要营养水平见表1。 　　1.2 试验方法 　　1.2.1 试验设计及饲养管理 黄河鲤鱼用基础饲料投喂驯化，以鱼体重的2.0%～2.5%投喂。每天投喂3次，8∶30、13∶30和18∶30各投喂一次，使其饱食而无饲料剩余。7 d驯化结束后，每个水族箱内选择健康、重量基本一致的试验鱼25尾，随机分为5组，其中Ⅰ组为对照组，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组为试验组，每组设3个重复，分别投喂在基础日粮中添加0.1‰、0.2‰、0.3‰、0.4‰枯草芽孢杆菌（无锡中顺生物技术有限公司产品，有效活菌数为2×109 CFU/g）的试验日粮，共计60 d。 　　1.2.2 生长性能指标的测定 试验结束后将黄河鲤鱼在玻璃水族箱中饥饿1 d，以减少肠道中食物残留对肠道消化酶活性的影响，对每尾鱼空腹称重。 　　增重率=[（末均重-初均重）/初均重]×100%； 　　饲料系数=饲料摄食量/（末均重-初均重）。 　　1.2.3 消化酶活性的测定 从每组每个水族箱中取3尾黄河鲤鱼，于冰盘上解剖，取出肠道和肝胰脏，剔除脂肪组织，用4 ℃预冷的去离子水冲洗，然后用滤纸轻轻吸干水分，放入-20 ℃冰箱中冷却保存，待检测消化酶活性。酶活性测定样品的制备参照文献[10]。酶粗提液蛋白质含量以牛血清白蛋白做标准，使用考马斯亮蓝法测定[11]；蛋白酶活性测定使用福林-酚试剂法[12]；淀粉酶使用淀粉-碘比色法[13]；植酸酶酶活性测定采用FeSO4-铝蓝法[14]。 　　1.2.4 数据处理 试验数据用Excel 2007作处理，所有数值用平均数±标准误差表示，对数据作单因素方差分析，做LSD多重比较，P0.05表示差异显著。 　　2 结果与分析 　　2.1 枯草芽孢杆菌对黄河鲤鱼生产性能的影响 　　添加枯草芽孢杆菌对黄河鲤鱼生产性能的影响见表2。由表2可知，添加枯草芽孢杆菌0.2‰、0.3‰、0.4‰试验组的增重率与对照组相比，均有显著性差异（P0.05）。与对照组相比，添加枯草芽孢杆菌0.2‰、0.3‰、0.4‰试验组的饲料系数显著性降低（P0.05），其中，添加0.2‰、0.3‰试验组的饲料系数也显著性低于0