观察植物细胞的有丝分裂课件 .docVIP

Sy-3 观察植物细胞的有丝分裂 Ⅰ　实验程序 一、实验原理 在植物体中，有丝分裂常见于根尖、茎尖形成层等分生组织的细胞。 根尖分生区细胞的特点是:在形状上呈正方形,在位置上排列紧密,在状态上有的细胞正在分裂。 高等植物细胞有丝分裂的过程分为分裂间期和有丝分裂的前期、中期、后期、末期。可以用高倍显微镜观察植物细胞有丝分裂的过程，根据各个细胞内染色体 or 染色质 的变化变化情况,识别该细胞处于有丝分裂过程及哪个时期。 细胞核内染色体容易被碱性染料 如龙胆紫溶液 着色。 15%HCl能够杀死和固定细胞、溶解细胞间质。 最容易找中期 染色体的着丝点排列在细胞中央赤道板上 ；后期染色体移在两极；末期两个新核正在形成；前期染色体分布散乱；间期细胞核大，细胞质浓。 二、目的要求 1.观察植物细胞有丝分裂的过程，识别有丝分裂的不同时期。 2.初步掌握制作洋葱根尖有丝分裂装片的技术。 3.初步掌握绘制生物图的方法。 三、材料用具试剂 1.材料:洋葱 可以用蒜、葱代替 。 2.用具:显微镜/载玻片/盖玻片/玻璃皿3个/镊子/剪刀/滴管。 3.试剂:质量分数为15%HCl、体积分数为95%的C2H5OH溶液、质量浓度为0.01g/mL龙胆紫溶液 or 醋酸洋红液 。 四、重点难点 重点:有丝分裂过程中各个期的特征、各期图形的辨认，有丝分裂实验过程。 难点:观察有丝分裂实验过程中应注意的问题。 五、实验步骤 录象观察 1.洋葱根尖的培养和取材 上午11:00 2.制装片 解离→漂洗→染色→制片 3.观察 ①低倍镜找分生区； ②高倍镜观察各个时期。 六、结论: 在显微镜的一个视野中看到的细胞，多数处于细胞有丝分裂的间期，因为在一个细胞周期中，间期所占的时间占整个细胞周期的90%～95%，时间与细胞数目成正比。另外，在一个视野中，往往不容易找全有丝分裂过程中各个时期的细胞，可以慢慢地移动装片，从邻近的分生区细胞中寻找。 Ⅱ　注意事项 1 培养产生洋葱根尖的材料是洋葱鳞茎。鳞茎底部接触水，不能离开水，也不能被水淹。其目的是同时满足其对水和空气的需要。同时要经常换水，因为水中由于微生物的活动和根细胞的活动，代谢产物增多和矿质素的减少；此外，还由于根细胞的呼吸不断产生CO2，使水中H2C03增多，氧气缺少；微生物，如细菌的大量繁殖也使水质受到污染，这些都不利于根尖生长，所以要经常换水。一般一天至少一次，还要提供适宜的温度。 2 剪取洋葱根尖材料时，应该在洋葱一天之中分裂最活跃的时间，一般在上午1l点左右。如果因气温影响或不在上述时间做实验的话，可以在细胞有丝分裂最盛时取材，放人盛有固定液的培养皿中固定，即浸泡半天到一天。固定后用70%乙醇冲洗几次，再放人盛有70%乙醇的小广口瓶中保存。注意要等根尖长到1～5cm时才能切取，而切取的洋葱根尖长度是2～3mm。这是因为，根据实验得知，根长到1～5cm时，根的长势最佳，此时细胞分裂最旺盛，容易找到不同时期的分裂图像。此时可 取生长健壮的根进行观察，切取洋葱根尖2～3mm，这个长度要从根的顶端 根冠 开始算起向上的距离，这个长度已将分生区包括了进来。若长度过长，在低倍镜下寻找分生区就会很困难。 3 根尖培养好以后，装片制作是否成功，关键的步骤是解离。15%的盐酸溶液能溶解细胞壁之间的中层物质 胞间质 ，使组织中的细胞相互分开。否则，在显微镜下观察时，细胞将发生重叠现象，导致实验失败。解离不充分，细胞重叠；解离过度，细胞会腐烂，所以解离要适度。为达到这一目的，配制的盐酸浓度要适宜，切取的根尖应立即放人15%的盐酸中，在室温下解离10～15min。解离时间要视室内温度而定，温度低，时间稍长，温度高，时间短。也可手拿镊子，轻轻按正在解离的根尖，感觉酥软即可。 4 漂洗的目的是洗去根中多余的解离液。如果不把多余的解离液洗去，一方面会影响染色效果，因为解离液中含HCl，而用染色的染料呈碱性；另一方面还会腐蚀显微镜的镜头。 5 染色时，染色液的浓度和染色时间必须掌握好。特别是染色不能过深，否则镜下一片紫色，无法观察。也不能过浅，否则染色质和染色体的形态和数目不易辨清。 6 制片时，一方面要用镊子把洋葱根尖弄碎，另一方面要压片，这样可以使细胞分散开来。压片时，在盖玻片上再加一片载玻片的目的，一是避免压碎和污染盖玻片。二是使压力均匀，从而使组织细胞均匀分散。同时用力必须恰当，过重时会将组织压烂，过轻则细胞未分散开，二者都将影响观察。 Ⅲ　随堂演练、 1.一条染色体经复制形成有姐妹染色体单体的正确形态是 2.经过漂洗的洋葱根尖放入盛有1% 即质量浓度为0.01g／mL 龙胆紫溶液的玻璃皿中染色，被染色的细胞构造是 A.整个细胞 B.细胞核 C.核仁 D.染色质和染色体 3.右图是一学生绘出的某高等