呼吸机能的综合实验(小鼠急性中毒性肺水肿).pptVIP

机能实验学 呼吸机能的综合实验 小鼠实验性肺水肿 内 容 实验目的 1 实验步骤 2 注意事项 3 实验结果 4 讨论 5 实验目的 通过这一实验，掌握复制中毒性肺水肿动物模型的基本技术，观察肺水肿时动物呼吸机能和全身状况的变化，并与药物解救组对照，探讨和了解药物的作用机制、中毒性肺水肿的发病机制及肺水肿进一步影响呼吸和循环机能的机制。 实验步骤 取小鼠3只，编号，称其体重，观察其呼吸频率、深度和一般情况。 1 给药：经腹腔分别给小鼠注射下述药物，注意抓取小鼠的手法和腹腔的注射方法。 2 实验步骤 药物浓度：肾上腺素（Adrenline） -- 1:1000 酚妥拉明（利奇丁）—0.1mg/ml Ad 0.1ml/10g 体重＋ 酚妥拉明 0.1ml/10g 体重 Ad 0.1ml/10g 体重＋ NS 0.1ml/10g 体重 NS 0.2ml/10g 体重（正常对照组） 1 2 3 实验步骤 观察：立即计时、观察动物的呼吸、口、鼻孔处及一般情况约30分钟，期间每5min数一下呼吸频率； 3 处死：小鼠死后或经30 min观察后处死； 4 实验步骤 3 解剖：将鼠腹面向上固定于手术台上，沿腹中线剪开颈部和胸部正中的皮肤，分离并用丝线结扎气管，沿腹中线纵向剖开胸腔，在气管结扎点的远心段剪断气管，借丝线轻提胸腔脏器、逐渐分离并完整地取出所有胸腔脏器； 取肺称重：从胸腔脏器中摘除心脏和胸腺，称取剩下的连带气管的肺的重量； 4 实验步骤 5 计算肺系数： 小鼠肺系数 肺重 mg /体重 g ； 再观察：在丝线结扎点的近心段剪断气管，压迫肺脏，观察气管内有无泡沫样液体流出。 6 注意事项 实验时取性别相同、体重相近或一致的实验鼠，以提高实验结果的可比性； 1 取肺时，注意气管先要结扎牢，分离中勿损伤肺表面，以免水肿液外漏影响实验结果 ； 2 注意正确使用精密电子天平 。 3 实验结果 1 2 描述小鼠在给药后的表现：呼吸、口鼻孔和全身一般情况； 列表比较：将本小组实验结果和全室结果中小鼠的肺系数填入下面两表中，采用适当统计学方法比较全实验室不同处理因素组小鼠肺系数间的差异。 组别 肺重 （mg ） 体重（g） 肺系数 肺重/体重 肾上腺素+NS 肾上腺素+ 酚妥拉明 NS 正常对照 表1 不同处理因素对3只小鼠肺系数的影响 表2 不同处理因素对小鼠肺系数影响的组间比较 鼠号 肾上腺素 + NS 肾上腺素 + 酚妥拉明 NS 1 2 3 · · · · · X± SD 讨 论 实验成功失败的经验教训。 1 2 分别论述实验现象的可能机制； 呼吸机能的综合实验中我们主要观察中毒剂量的肾上腺素导致小鼠实验性肺水肿以及酚妥拉明对小鼠肺水肿的解救作用。 * 下面先介绍一下本实验所涉及到的内容，包括：实验目的、实验步骤、实验中的注意事项、实验结果和讨论。 * 本次实验的目的在于让同学们掌握复制中毒性肺水肿动物模型的基本技术，观察肺水肿时动物呼吸机能和全身状况的变化，并与药物解救组对照，探讨和了解药物的作用机制、中毒性肺水肿的发病机制及肺水肿进一步影响呼吸和循环机能的机制。 * 下面我们来看一下具体的操作步骤：首先我们取3只小鼠，编号，称重，并观察每只小鼠的呼吸频率、深度和一般情况。然后分别给小鼠腹腔注射下列药物，需要注意抓取小鼠的手法和腹腔的注射方法。 * 图上所示为正确的小鼠抓取和腹腔注射方法。 * 1号小鼠小鼠为肾上腺素中毒小鼠，先按照每10克体重0.1ml注射肾上腺素，再立即注射等量生理盐水。2号小鼠为中毒解救小鼠，先注射每10克体重0.1ml肾上腺素后，立即注射等量酚妥拉明解救。3号小鼠为正常对照小鼠，腹腔注射生理盐水0.2ml每10克体重。所用药物的浓度分别是，肾上腺素1:1000，酚妥拉明0.1mg/ml。 * 每只小鼠腹腔注射完毕后，立即计时，观察小鼠的呼吸、口、鼻孔处以及一般情况约30分钟，在此期间每5min数一下呼吸频率，然后颈椎脱臼处死小鼠。 * 小鼠中毒死亡或颈椎脱臼处死后进行解剖，将小鼠的腹面向上固定在手术台上，沿腹中线剪开颈部和胸部正中的皮肤，分离出气管并用丝线结扎，沿腹中线纵向剖开胸腔，在气管结扎点的远心段剪断气管，轻轻提起丝线，将胸腔脏器与周围胸壁分离开来，完整地取出所有胸腔脏器，然后从取出的胸腔脏器中摘除心脏和胸腺，称取剩下的连带气管的肺的重量； * 肺重称好之后，我们计算一下肺系数。小鼠肺系数等于肺重比上体重，其中肺重的单位是毫克，体重的单位是克。然后，我们在丝线结扎点的近心段剪断气管，压迫一下肺脏，观察气管内有无泡沫样液体流出。 * 实验操作结束后，清理桌面、清洗器材等。实验过程中要注意以下这些问题：（1）要取性别相同、体重相近或一致的小鼠，以提高实