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- 2018-06-04 发布于贵州
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转录组测序以及常算法简介
转录组测序以及常用算法简介
转录组测序,也被称为“全转录组鸟枪法测序”(WTSS),由于转录组测序的高覆盖率,它也被称为深度测序。它主要利用新一代高通量测序技术,对物种或组织的RNA反转录而成的cDNA文库进行测序,并得到相关的RNA信息。其研究对象为特定细胞在某一功能状态下所能转录出来的所有RNA的总和,包括mRNA和非编码RNA。它是指用新一代高通量测序技术,对物种或组织的RNA反转录而成的cDNA文库进行测序,并得到相关的RNA信息。转录组测序根据有无基因组参考序列分为:有参考基因组的转录组测序,和无参考基因组的de novo测序。如果有基因组参考序列,可以把转录本映射回基因组,确定转录本位置、剪切情况等更为全面的遗传信息,而这些遗传信息可以广泛应用于生物学研究、医学研究、临床研究中。虽然转录组测序和基因组测序的步骤大体相同,但是在文库制备和分析方法上却有很大的区别。在生物信息学领域,序列比对作为识别DNA、RNA和蛋白质相似区域的有效手段,有助于我们更好地研究其结构、功能以及进化方向的关系。下图简要说明了转录组测序的主要流程:首先将细胞中所有的反转录产物转化为cDNA文库,再将cDNA随机剪切为小DNA片段,并在两端加上接头(Adapter),所得序列通过比对(有参考基因组)或者从头组装de novo(无参考基因组),形成全基因组范围的转录谱。
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图1 转录组测序流程
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