DNA的粗提取与鉴定-上课重点.pptVIP

* * * DNA的粗提取和鉴定 [来源:Zxxk.Com] （一）实验材料的选取 （二）破碎细胞，获取含DNA的滤液 （三）除去滤液中的杂质 纯化 （四） DNA的析出与鉴定 二、实验设计: 选择什么样的材料比较容易成功？ 不同的生物材料方法有什么不同？ 有哪些方法可以出去杂质？ 哺乳动物的血细胞：无细胞核及细胞器。 大肠杆菌（原核）：DNA含量少。 鱼卵：减数分裂的产物，DNA含量减少。 （一）实验材料的选取 从下列材料中选取2～3种 原则： 菜花、香蕉、猕猴桃、洋葱、豌豆、菠菜； 鱼卵、猪肝、鸡血、哺乳动物的红细胞； 在液体培养基中培养的大肠杆菌 凡是含有DNA的生物材料都可以考虑 选用DNA含量相对较高的组织 （二）破碎细胞，获取含DNA的滤液 1、动物细胞 2、植物细胞 ——如何破碎？ ——如何破碎？ 鸡血细胞：加入一定量的蒸馏水 细胞吸水胀破 ，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液 为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂？ 蒸馏水相对于鸡血细胞是一种低渗溶液，水分可以大量进入血细胞内，使细胞胀裂。 先用洗涤剂溶解细胞膜，在进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集滤液 洗涤剂：溶解细胞膜，利于DNA释放 食 盐：NaCl，利于DNA的溶解于研磨液中 加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么？ 研磨可破碎细胞壁，使细胞核内的DNA释放。若研磨不充分，会使提取的DNA量变少，导致看不到丝状沉淀