大学生科技创新期检查表4.docVIP

附件2： 南京林业大学 大学生科技创新项目 中期检查报告 （ 2012—2013 年度） 项目名称： 四照花组培快繁体系的建立 申 请 人： 所在学院： 森林资源与环境学院 专业年级： 水土保持与生态工程 （1001010） 联系电话： 指导教师: 职称 副教授 申报日期： 2011 年 12 月 7 日 成果类别： *自然科学类学术论文 哲学社会科学类社会调查报告和学术论文 科技发明制作 资助金额： 500元 共青团南京林业大学委员会 填 表 说 明 一、本报告需实事求是，逐条认真填写，尚未结束研究工作的项目负责人均需填报此表； 二 、本报告一律要求用A4纸的打印稿件，于左侧装订成册。一式三份，由指导教师和所在学院团委审查并签署意见后报送校团委； 三、如表格不够，可以加附页； 四、本报告需按指定时间递交，逾期不交者，按自动放弃处理，并追回全部资助经费； 五、本报告考核未合格者，追回全部资助经费。 一、总体目标（根据项目申请书填写） 四照花集药用、观赏，绿化等多种价值于一身，是一种很有开发利用前景的树种。目前生产上四照花的繁殖以播种育苗为主，但存在萌发率低、发芽不整齐及发芽持续时间长等问题。四照花组培快繁研究方面尚未见报道。本项目通过，形成一套完整的技术体系在较短时间内提高的繁殖系数为快速繁殖研究奠定工作基础 前期项目研究分为两个步骤： 2012年3月-2012年8月 A5 15s+5min A8 20s+5min A11 30s+5min 6min A3 10s+6min A6 15s+6min A9 20s+6min A12 30s+6min 外植体消毒是植物组织培养的第一步，也是无菌快繁体系建立的重要环节。由图1可知，处理A1和A2的污染率分别为33.33%和25.00%。随着酒精和升汞时间的延长，处理A3、A4和A5污染率有所下降，相应的存活率大大提高到100%。处理A10、A11和A12污染率降到0，但存活率却降到60%，这可能是酒精消毒30s对芽的伤害较大。 图1不同消毒时间对外植体消毒效果的影响 既要保证污染率又要有高的存活率，综合以上分析，以A7处理最好，即先用75%酒精处理20s后，再用0.1%升汞处理4min。 2.不定芽诱导 将1.0～2.0cm的带芽嫩茎和顶芽接种到添加不同浓度IBA的MS+6-BA 2.0mg/L培养基上进行不定芽的诱导。40d后统计诱导率和有效芽个数。 表2不同浓度IBA对不定芽诱导的影响 处理 IBA浓度 重复 接种个数 分化个数 丛生芽个数 率 平均率 有效芽数/个 平均有效芽数/个 0.1 Ⅰ-1 9 7 32 77.8% 74.% 3.6 4.0 Ⅰ Ⅰ-2 9 6 35 66.7% 3.9 Ⅰ-3 9 7 40 77.8% 4.5 0.5 Ⅱ-1 9 8 36 88.9% 88.9% 4.0 4.2 Ⅱ Ⅱ-2 9 7 37 77.8% 4.1 Ⅱ-3 9 9 40 100% 4.5 1.0 Ⅲ-1 9 9 41 100% 96.3% 4.6 4.7 Ⅲ Ⅲ-2 9 8 45 88.9% 5.0 Ⅲ-3 9 9 40 100% 4.5 带芽嫩茎在不定芽诱导培养基上培养20d左右基部膨大，30d少数分化形成不定芽丛，培养40d不定芽的诱导情况见表2。由表2可知，在6-BA浓度为2.0mg/L的条件下，不同浓度的IBA对不定芽分化影响有差异。20d后统计，Ⅰ号没有丛生芽的产生，并有枯萎死亡现象。Ⅱ号，Ⅲ号有个别产生丛生芽。40d后统计，随着IBA浓度的升高，分化率不断增加，IBA浓度为1.0mg/L时，分化率达到100%，分化的芽较多，生长快，而Ⅱ号芽分化的也较多，但出现叶片枯萎叶片黄绿的状态（如图2-1,2-2,2-3）可见低浓度的IBA不利于四照花芽的分化，而MS+6-BA2.0mg/L+IBA1.0mg/L为最佳，后期将继续试验IBA浓度继续增大时对不定芽分化的影响。 图2-1未分化的不定芽 图2-2 生长不良的不定芽 图2-3分化良好的不定芽丛 3.增殖培养 植物组织培养过程中很多时候会用到生长素与细胞分裂素，不同的激素比值会对植物有很大的影响。在诱导丛生芽培养基的基础上，进一步进行增殖培养。目前只探索了一个培养基方案，即：MS+6-BA2.0mg/L+IBA 0.5mg/L，每个重复9瓶，每瓶3个材料，30d后统计增殖系数。 表3 不定芽增殖系数统计 处理 每个重复的总芽数（个/3瓶） 增殖系数 平均增殖系数 重复1 20 17 15 1.96 1.83 重复2 14 14 18 1.70 重复3 15 20 14 1.82 由表3可知，四照花不定芽在MS+6-BA2.0mg/L+IBA 0.5mg/L培养基上的增