REAGEN阿维菌素伊维菌素测试盒.docVIP

REAGEN?阿维菌素/伊维菌素测试盒 RND99032 1．REAGEN?阿维菌素类药物竞争ELISA75 - 105%. 高重复性。 检测过程只需要不到2小时2．试剂盒原理REAGEN?阿维菌素类药物试剂盒采用间接竞争ELISA方法，在微孔条上预包被偶联抗原，样本中残留的阿维菌素类药物与微孔条上预包被的偶联抗原竞争抗阿维菌素类药物的抗体，加入酶标二抗后，用TMB底物显色，样本吸光值与残留物阿维菌素类药物的含量成负相关3. 试剂盒组成 规格 保存条件 阿维菌素包被板 96孔板（12×8 孔 2-8℃ 伊维菌素标准品： 0 ng/ml 阴性质控 0.5ng/mL 1.0ng/mL 2.0ng/mL 4.0ng/mL 8.0ng/mL 回收用1200ng/ml 1.0mL 1.0mL 1.0mL 1.0mL 1.0mL 1.0mL 1.0mL 2-8℃ 阿维菌素一抗（Avermectins Antibody #1） 12 mL 2-8℃ 100x酶标二抗（100X HRP-Conjugated Antibody #2 ） 250 L 二抗稀释液（Antibody #2 Diluent） 20 mL 20×浓缩洗液 Wash Solution 30mL 终止液 Stop Buffer 14mL TMB底物 TMB Substrate 10mL 10x样品提取液 10x Sample Extraction Buffer 阿维菌素清洁混合物 Avermectin Clean Up Mix 牛奶提取液1（Milk Extraction Buffer I） 牛奶提取液2 Milk Extraction Buffer II 25ml 25g 10ml 28ml 本试剂盒应当在2-8℃的温度下储存，有效期为一年。0℃或者冰冻保存。 4.检测下限 检测物质 检测下限（ng/g） 2.5 肝脏 10 牛奶 2.5 尿样 2.5 水样 2.5 5.交叉反应： 交叉反应物质 交叉反应率（%） 100 依马菌素 100 阿维菌素 113 依普菌素 100 道拉菌素 1 莫西菌素 1 米白菌素 1 6．未提的设备或材料 酶标仪 恒温培养箱 涡流振荡器 移液器 10、20和100 L，1mL各一支 50-300 L） 乙腈 乙醇 7.注意事项 实验前请阅读以下文字，以保证获得最佳实验效果。 标准品中含有伊维菌素，请小心使用。 不要使用过期的试剂盒。 不同批次的试剂盒不要混用，抗体和微孔板具有盒与批次的特异性。 尽量保持室温20-25℃，避免在通风口操作防止温度过低，过热和/或者蒸发。同样的，不要在阳光直射下实验，防止过热及蒸发。在孵育期间，如果工作台温度过低，应该铺垫若干纸巾或者其他物料。 水质量很重要，确保使用蒸馏或者去离子水。 加入样品或者试剂到空的微孔板时，吸嘴靠于微孔接近底部，并保持接触。 孵育时间的计算越规范越好，保持添加标准品的一致性，先添加标准品后添加样品。 从低浓度到高浓度地添加标准品，降低影响标准品曲线质量的风险。 将微孔板置于放有干燥剂的密封袋中，冷藏保存。 8．试剂的准备 1×样品提取液 按1：9的比例配制样品提取浓缩液和双蒸馏水。35%的乙醇样品提取液 6.5体积的样品提取液和3.5体积的乙醇混合 肉/鱼/虾 将适量样品匀浆. 称取2 g 匀质样品. 加入 6 mL的乙腈, 2 mL正己烷,1 g 无水硫酸镁, 最大转速涡流1分钟，然后震荡15分钟。 室温 20 - 25 C / 68 - 77 F 下 4,000 x g 离心10分钟. 除去正己烷层，移取1.0 mL 上清液（250 mg阿维菌素）到新的2 mL小管中 涡流1分钟，静置5分钟，室温最大速度离心5分钟 取400 uL 上层液到2 mL 小管中，50℃下用旋转蒸干仪蒸干，也可以用吹氮仪在50℃水浴中将样品吹干。 加入500 uL 乙醇/1X 样品提取液，涡流2分钟 取50 uL 上清液用于检测。 稀释倍数: 5.0 牛奶对于含脂牛奶10,000 x g 离心 5 分钟或者4,000 x g 离心 30 分钟, 除去上层脂肪层对于无脂牛奶，2 mL牛奶样品，加入 6 mL 乙腈、0.1 mL 牛奶提取液1，振荡 5秒,加入0.35 mL牛奶提取2，最大速度涡流2分钟或剧烈震荡10分钟。 4,000 x g离心10分钟 移取0.4 mL乙腈上层液 相当于0.1 mL的原始牛奶样品 进入新的试管中，用旋转蒸干仪在50 C水浴中将样品蒸干，也可以用吹氮仪将样品在50 C水浴中吹干 将干燥物溶解在 0.5 mL 35% 乙醇/1倍样品提取液中，涡流1分钟 取50