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纳米材料毒性测试21世纪：预测性毒理学方法和高通量筛选的使用 概论 工程纳米材料（ENMs）的生产（能源管理体系）是材料设计和新的消费产品开发的一个科学的突破。纳米技术的成功实施是全球重要的经济增长，但是我们还需要考虑由于可能产生有害生物效果的新的物理化学性质所带来的可能的环境健康和安全（EHS）的影响。为了评估工程纳米材料的风险，需要可靠和可再现的筛选方法，以测试基本材料以及纳米产品。需要一个能够探讨在纳米/生物界潜在无数的生物物理化学间的相互作用的平台，以响应我们已经开发出的一种预测性毒理学方法。我们定义了一个预测毒理学方法，机制基础的使用在体外进行高通量筛选对可能导致在体内病理或者疾病产生的能源管理的物理化学性质进行预测。在体内的结果是用来验证和提高体外高通量筛选（）构效关系（SARS）。高通量筛选构效关系人类或环境暴露人群的风险可以限制或避免风险高通量筛选构效关系描述基于溶解化学表征为毒性的主要预测因子高通量筛选我们实现了我们自己的内部合成和获得成分和组合库高数据生成的内容。化学成分很重要,因为它决定了表面化学、表面能、氧化还原状态,光活化的潜力,表面缺陷、电荷和定义表面反应性材料化学和表面涂层也确定润湿性,悬浮稳定性、溶解性、尽管纳米尺寸和相应的增加表面积有助于表面反应活性其他物理化学性质如尺寸、形状、聚集状态,晶体结构表面电荷和表面涂层是可以归因于相对特异性生物反应材料的大小形状和持久性但也铈高通量筛选Brinker 和Zink在这个特殊版本中的一个独立贡献中讨论的。 对于预测毒理学方法的第二个基础建设要求是合理的高通量筛选方法的开发以定量评估在体内预测的不良后果的剂量和时间依赖细胞损伤反应。生物、医学、药学和毒理学的研究已经表明一个系统生物方法是如何可以用于高通量筛选的。虽然对有毒物质（如化学品）风险评估的现有方法非常依赖于在动物模型中极端不利于健康的影响，一个不良健康后果的说明并不会为预测毒理学建模的性能提供一个坚决基于科学的平台。虽然这是合理的，新的筛选模式在可以用于高通量筛选开发之前能够通过蛋白质组学或者基础基因组和基础途径方法被发现。目前最快速的平台是可链接到疾病的发病机理的机械细胞损伤反应的应用。这些毒理学途径的定量评估允许高通量筛选用于体内预测决策，从而限制动物作为主要测试平台来使用。虽然在体外到体内相比较的预测潜力仍然处于起步阶段，大量的细胞损伤反应机制已经成形，这可以定量实施以评估危险性工程纳米材料属性。一些毒理学机制让我们为毒理学建模建立我们第一代纳米构效关系。虽然到目前为止大部分纳米构效关系都是基于已知的毒理学途径，诸如蛋白质组学和基因组学的发现平台将很可能会在未来提供新的筛选模式。 第三个要考虑的关键因素即机械损伤途径的使用，其中一个最好的已经在我们的研究中发现的高通量筛选例子是筛选生物活性氧类产品和对金属氧化物纳米粒子、电子/空穴对代、表面缺陷、化学溶解和释放有毒金属离子等能带的氧化应激反应。我们用一种兼容荧光染料混合物去开发一种筛选细胞中致死和亚致死氧化损伤反应的功能接系列的荧光显微基础方法。这种由384孔板机械处理进行的多参数高通量筛选检测同时细胞总数和细胞核的大小、线粒体膜电位、细胞内钙离子通量和衰亡细胞膜通透性增加进行评定。这些细胞反应之间的功能联系表明检测还能够评估那些表面膜损伤或者细胞器损伤比产生活性氧类更重要的工程纳米材料。虽然在单个参数分析中可以获得类似的风险等级（例如MTS、LDT释放或细胞ATP含量），大批量、与时间相关的高通量筛选数据集使我们可以开发能够建立纳米构效关系的机器学习及风险等级工具。除了氧化应激，其他损伤机制出现在高通量筛选，包括长宽比材料炎性体激活、细胞因子和趋化因子的生产、光活化、膜损伤（针对阳离子或活性材料表面）、促纤维化反应、报道基因通过氧化应激信号通路或者DNA损伤的转录激活、孵化酶的抑制作用和斑马鱼胚胎的转基因热休克蛋白的表达。上述的所有反应可以通过例如荧光显微镜、发光基础记录基因活性、膜溶解检测复用因子检测、明场显微镜读出程序发展成自动化的高通量筛选。除了哺乳动物细胞的筛选，我们也实现了在鱼鳃细胞系我们如何执行一个没有一个全面的了解TiO2 和纳米CeO2相距甚远。从机械角度看，细胞内Zn2+的释放诱导氧化应激反应，这是多参数分析的基础。肺部以及全身溶解氧化锌颗粒的氧化应激诱导可以通过使用血红素加氧酶-1（HO-1）μg/mL的氧化铝二氧化硅四氧化三铁氧化铈四氧化三钴二氧化钛氧化锌氧化铜氧化或还原性物质可以通过增加活性氧的产生和/或减少抗氧化水平干扰这种氧化还原平衡。氧化应激的升级可以转移激活促炎症信号转导通路的细胞反应（2级）或线粒体介导的细胞毒性（3级）牛血清白蛋白（BSA）完成和二棕榈酰磷脂酰胆碱（DPPC）作为替代肺流体元件IL-