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- 2016-10-12 发布于贵州
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抗体的选择和保指南
抗体选择指南
抗体保存指南
?? 抗体说明书样本
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一 抗体选择指南
:检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择,为缩小抗体的选择范围选中合适的抗体,需要考虑如下几种因素:
?分析或应用的类型
?样本蛋白的结构性质
?样本的种属
?抗体宿主的种类
?抗体的标记和检测
1分析试验的应用类型?? 一般抗体说明书都列出该抗体经试验验证过适用于何种分析类型,如:可以应用于WB? IHC? ICC? ELASA分析等,如果抗体说明书没有提及的应用类型,并不意味着该抗体不适用于此种分析应用类型,而仅是说明尚未经过此种分析试验验证,如果抗体不适用某些分析试验,则会在抗体说明书上标注出来不适于某分析试验。
2? 样本蛋白的结构性质 ?了解样本蛋白的结构性质有助于选择最合适的抗体,至少两方面因素需要考虑
(1)..待测样本蛋白的结构域:抗体是由各种不同免疫原免疫宿主而制备得来,其中的免疫原包括:全长蛋白、蛋白片断、多肽、全有机体(如:细菌)或细胞,抗体说明书一般都有免疫原的描述,如果打算检测的是蛋白片断或一种特殊的同型物或蛋白全长的某一区域,则必须选择用含此片段域的免疫原制备出的抗体。如果打算用FACS流式检测活细胞的表面蛋白,则需要选择含该表面蛋白的胞外域来免疫制备的抗体。
(2)样本的提取或处理过程:某些抗体要求样本经过某些特殊处理,例如:许多抗体只识别还原和变性的、表位已暴露不
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