液相色谱进阶讲之梯度洗脱.docVIP

主题：液相色谱进阶讲座之梯度洗脱简介：通过实例详细介绍“梯度洗脱”的意义、应用领域、操作方法以及优化，相信能够使广大网友的液相色谱技术有一些崭新的提高欢迎参与交流和讨论梯度洗脱gradient elution1 简介通常情况下，液相色谱操作中的流动相组成和比例是恒定的，这种洗脱化合物的方式被称为等度洗脱；但是为了改善分析结果，某些操作需要连续改变流动相中各溶剂组分的比例以连续改变流动相的极性，使每个分析组分都有合适的容量因子k，并使样品种的所有组分可在最短时间内实现最佳分离，这种洗脱方式称为梯度洗脱。2 梯度洗脱的应用梯度洗脱可在下列情形中发挥重要作用：A 在等度下具有较宽k值的多种样品分析。B 大分子样品分析。C 样品含有强保留的干扰物，在目标化合物出峰后设置梯度洗脱，将干扰物洗脱出来，以免其影响下一次分析。D 单组份化合物方法建立时，不知道其洗脱情况，使用梯度洗脱，找出其较优的洗脱条件。多组分分析时，这些组分往往具有很宽的k值范围。假如使用等度洗脱，这些化合物的k值无法同时落在1~10之间，结果就是，无法同时得到较好的分离度、较短的分离时间、较高的响应值。图T1、T2、T3是笔者不同条件下分析邻苯二甲酸酯类化合物得到的色谱图。图T1??(等度，流动相：80%乙腈水溶液)图T2 (等度，流动相：100%乙腈)图T3 (梯度，0-5 min，乙腈