动物实验操作2031213.doc

实验动物基本实验操作技术 一、实验分组：6人/组（桌）；每2人为一个小组。 二、操作程序： 每个小组完成1只小鼠抓取、徒手固定、性别判断、苦味酸标记、腹腔注射生理盐水（1ml注射器）、灌胃生理盐水（1ml注射器，灌胃针）、摘眼球取血（组织镊或血管钳、指形管）、脱颈椎处死动物，6个脏器采集（组织镊、血管钳、手术剪、泡沫固定板）。 1桌1只兔，完成兔的抓取、保定、性别判断、肌肉注射生理盐水、耳缘静脉注射生理盐水。 三、实验报告(20分) 1、小鼠编号: 2、小鼠性别: 3、兔的性别： 4、小鼠灌胃药量： 5、小鼠腹腔注射药量： 6、兔耳缘静脉注给药量： 7、兔肌肉注射注给药量 8、标本: 1)小鼠血液：1份/小组； 2)小鼠脏器:心,肺,脾,肾,肝,睾丸(子宫)等6个，放置于纸板并标明脏器名称：1份/小组； 3)小鼠尸体，放置于泡沫板：1只/小组 9、洗净的器械： 手术剪1把/小组，组织镊1把/小组，血管钳1把/小组、灌胃针头（2个/桌子）。 组号： 1、姓名： 学号 2、姓名： 学号： 成绩： 操作时间要求：1班在14；55前完成操作，整理好试验台；2班在16:55前完成操作和试验台整理清洁工作。配合老师完成实验室清洁整理工作。 四、操作内容 一)、抓取、固定、性别判定 1小鼠 徒手抓取固定 小鼠性别判断最常用的方法是根据动物的生殖孔与肛门之间的距离，距离长的为雄性，短的为雌性。本法适用于所有年龄段小鼠。 2兔 用右手抓住颈部的被毛和皮肤，轻轻提起迅速用左手托起兔一般不会咬人，但脚爪锐利忌强抓兔的耳朵、腰部或四肢 1：左前肢 ； 2. 左后肢；3：右前肢 三)、给药方法 1. 小鼠腹腔注射(i.p)： 下腹部腹中线两侧 左手抓住动物，腹部向上，右手将注射针头于左（或右）下腹部刺入皮下，使针头向前推?0.5～1.0cm，以45度角穿过腹肌，固定针头，缓缓注入药液，为避免伤及内脏，可使动物处于头低位，使内脏移向上腹。 2. 小鼠经口给药/灌胃（i.g)： 　　多用灌胃法，此法剂量准确，适用于小鼠、大鼠、家兔等动物。 　 灌胃器由特殊的灌胃针构成。单手保定动物，一般左手拇指和食指抓紧动物两耳间头部皮肤，其他三指抓住背部皮肤，将鼠抓在手掌内固定动物，使动物头部向上，头向后仰以便口腔和食管呈直线。右手持灌胃器，将灌胃针从右口角插入口中，沿咽后壁顺着上腭到达咽部，靠动物的吞咽进入食管，灌胃針插入时应无阻力，如有阻力或动物挣扎则应退针或将针拔出，以免损伤、穿破食道或误入气管。灌胃针插入需要到达的位置后，缓慢注入药物。灌药完毕，轻轻拔出灌胃针。 一般当灌胃针插入小鼠3～4cm，大鼠或豚鼠4～6cm后可将药物注入。 3.兔耳缘静脉注射 用手指弹动或轻揉兔耳，使静脉充盈，左手食指和中指夹住静脉的近端，拇指绷紧静脉的远端，无名指及小指垫在下面，右手持注射器连6号针头尽量从静脉的远端刺入，移动拇指于针头上以固定针头，放开食指和中指，将药液注入，然后拔出针头，用手压迫针眼片刻。 4.兔肌肉注射 选择肌肉发达，无大血管通过的部位。一般采用臀部。大、小鼠、地鼠、豚鼠等小动物常用大腿外侧肌肉。捏住注射部位肌肉，将针头垂直或以60°角斜刺入肌肉，回抽无血，即可注射。注射后轻按注射部位，促进药物吸收。 四)、小鼠摘眼球采血采血 采血时，用左手固定动物，压迫眼球，使眼球突出，右手用弯头镊子迅速摘除眼球，眼眶内很快流出血液 五) 小鼠的颈椎脱臼法处死 右手抓住鼠尾用力向后拉，同时左手拇指与食指用力向下按住鼠头。将脊髓与脑髓拉断。 六) 小鼠脏器采集 实验动物剖检，一般取仰卧位。一般先切断肩胛骨内侧和髋关节周围肌肉，使四肢摊开(仅以部分皮肤与躯体相连)然后沿腹中线由剑状软骨到肛门切开腹壁，再沿左右最后肋骨切开腹壁到脊柱部。 1、胸腔脏器的采集 用镊子夹住胸骨剑状突，剪断横膈膜与胸骨的连结，然后提起胸骨，在靠近胸椎基部，剪断左右胸壁的肋骨，将整个胸壁取下。打开胸腔后，注意检查胸腔液的数量和性状，胸膜的色泽，有无出血、充血或粘连等。检查心包时，注意心包的光泽度及包内的液体数量、色泽、性质及透明度。 1.1 胸腺采出 采取胸部器官时，首先要采出胸腺，然后采出心脏和肺脏。应特别小心防止胸腺易被破坏。 1.2 心脏采出 在心包左侧中央作十字形切口，用镊子夹住心尖，提出心脏，可沿心脏左侧的左纵沟切