植物组织中水势的测定讲义.ppt

植物组织水势的测定 (二)实验材料 大叶黄杨叶片(取叶片8-10个,随去随用,不要带枝条?) 试剂: CaCl2溶液: 0.05,0.1,0.2,0.3,0.4,0.5 mol·kg-1H2O 甲烯蓝粉末 取干燥洁净的试管12支,分成甲、乙两组。 甲组试管中分别加0.05~0.5 六种浓度的溶液之一各0.5ml(量准确?)。用一只移液器 低 高。 乙组试管加入6种浓度的CaCl2溶液各4ml,用一只移液器 低 高。4ml需要很准确吗? 4. 甲、乙两组试管分别塞上相应的橡皮塞备用。 为什么盖橡皮塞? 5. 选取均匀一致的植物叶片8~10片(勿水洗!),打取叶圆片60余片,甲组试管内各加入叶圆片10个,使叶片浸入溶液,盖上橡皮塞,平衡20min以上。期间多次摇动试管,以加速水分平衡。 6. 染色:在甲组每一试管中用解剖针放入微量甲烯蓝粉末,摇匀,溶液变蓝。(干燥针头先用蒸馏水湿润,加入的甲烯蓝量一定少) 7. 观察液滴升降: 用毛细管取甲组试管有色液 乙组试管中部 液滴位置?观察液滴升降并记录。 8. 分别测定不同浓度中有色液滴的升降,找出与组织水分势相当的浓度,根据原理公式计算出组织的水势。 加样器的使用 仪器操作特别注意: 1、拔下样品室插头时握住插头,严禁连线插拔,并且不要传动连线; 2、样品一定放平,防止污染探头(热电偶)。 HR-33T-R型露点微伏压计 C-52样品室 露点微伏压计操作方法 2、植物材料的平衡 1、植物材料:大叶黄杨叶圆片 (小液流打取的叶圆片1片) 逆时针旋转样品室上部调节旋钮,打开样品室。 干旱叶片平衡时间延长 顺时针转动调节旋钮封闭样品室 平衡20min 打开主机电源 ℃/μV开关置于“μV” 位置 连接探头 FUNCTION旋钮置于“SHORT” 调节Πv值 按下Πv按钮 调节Πv SET旋钮使表头指针达到已知的Πv值 调零 量程(RANGE)旋钮放在预期的位置上,30 FUNCTION旋钮放在READ位置上 调节ZERO OFFSET旋钮使指针读数为零 { FUNCTION旋钮调到“COOL”位置 指针右移达到最大 FUNCTION旋钮调到“DP”位置 指针向左偏转 读取测定值 FUNCTION置于“SHORT” 拔出探头 关闭电源 (1)打开主机电源开关。将℃/μV开关置于“μV” 位置。 (2) 将C-52探头连接到插口上。 注意:在连接和拔出C52探头时FUNCTION开关处在 “SHORT” 位置上。 2、测定 严禁手握插头连线插拔探头 (3)按下Πv按钮,调节Πv SET旋钮使表头指针达到C52连接线上标注的Πv值。 (4)将量程(RANGE)旋钮放在预期的位置上(通常在30位置),FUNCTION旋钮放在READ位置上,调节ZERO OFFSET旋钮使指针读数为零。 (5)将FUNCTION旋钮调到COOL位置,此时表头的指针向右偏转,当指针移动到最大时,将FUNCTION旋钮调到DP位置,此时表头的指针向左偏转,当表头的指针稳定后,从表头上读取测定值。 如果RANGE旋钮位于10或100的位置,按上排刻度读数 如果RANGE旋钮位于30或300的位置,按下排刻度读数 读数为电势差,电势差与水势的呈线性函数,比例系数为﹣7.5μV/MPa。 样品水势(MPa)= 读数μV/(-7.5μV/MPa) 测定结束,打开C-52顶部的旋钮,推出样品室 清理植物组织 * 目的要求: 1、了解测定植物组织水势的方法及其优缺点; 2、学习用小液流法测定植物组织水势的方法; 3、掌握露点法测定植物组织水势的原理与方法。 特别注意(小液流法): 1、使用干燥试管;实验结束后试管一定要洗刷干净。 2、试管上附着的甲烯兰,用铬酸洗液浸泡,自来水冲洗干净后交给老师,检查合格,老师统一用蒸馏水冲洗后烘干。 水势表示水分的化学势; 水从水势高处流向低处; 植物体细胞之间,组织之间以及植物和环境之间的水分移动方向由水势差决定(流速和方向)。 水势: 植物组织水势(和渗透势)的测定方法: 液相平衡法-小液流法、重量法;质壁分离法。 所需仪器设备简单,但手续繁琐、效率低,难以自动记录。 压力平衡法-压力室法。 适于测定枝条或整个叶片的水势,对于小型样品叶圆片等 则无能为力。 气相平衡法

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