第四章DNA的复制2详细分析.ppt

DNA的复制 DNA Replication 讲授：陈友 教学重点 参与复制的主要物质及其作用 DNA复制的起始、延伸和终止（以E.coli为例） （二）DNA聚合反应的特征 1、DNA的聚合反应是以dNTP为底物，以3’ →5 ’ DNA为模板，按碱基配对原则在3’-OH上加dNTP （DNA聚合酶对碱基的选择功能） 2、需二价正离子如Mg＋， 3’-OH作亲核进攻形成磷酸 二酯键 3、链沿5’ 3’方向延长 4、碱基互补配对，若错配则切除掉 第三节 真核生物DNA复制 一、概述 （一）复制与细胞周期 S期 早：常染色质， 中：异染色质， 晚：着丝粒和端粒 （二）复制频率 每个细胞周期复制一次 （三）复制与核小体 1、 复制叉形成时DNA从核小体解离，组蛋白八聚体解聚 2、复制叉通过后新、旧组蛋白与DNA重新组装成核小体 （二）复制子簇（cluster of replicons） 特点 1、由多个复制子组成，20-50个串联排列 2、同一复制子簇内的复制子基本同步起始 （二）真核生物DNA聚合酶 1、 DNA Pol ? （作用：复制的引发） 复合体（ Pol ? /引发酶） （1）引发酶活性 合成前导链和每个后随链每个片段的RNA引物 （2）5′→3′聚合酶活性 可继续延长DNA（a few hundred nt）但很快 被 Pol ?代替 2、 DNA Pol ?（作用：前导链、滞后链延长，校对功能） （1） 5′→3′聚合酶活性 （2） 3 ′→5 ′核酸外切酶活性 四、真核生物DNA复制的终止 1、终止位点： 不存在使复制叉终止和解聚的终止位点(Termini) 2、终止机制： 复制终止通过复制叉的相遇而终止 五、真核生物染色体 DNA末端复制 （一）端粒（Telomere） 1、概念：是真核生物染色体末端的一种特殊结构 2、组成：端粒DNA / 端粒蛋白 （1）端粒蛋白 ：非组蛋白 （2）端粒DNA ： a、含数百个短的正向重复序列，富含GC b、通式：Cn（A/T）m n?1，m=1-4 （二）端粒酶 1、组成 （1）蛋白质：逆转录酶 （2）RNA：约150nt，部分序列与端粒DNA互补， 可作为合成端粒DNA的模板 （端粒酶是自身携带RNA模板的逆转录酶） 2、功能：负责端粒DNA的延长，维持端粒的长度 3、存在部位： 在干细胞、生殖细胞和肿瘤细胞， 才可以检测到具有活性的端粒酶 4、端粒酶和衰老、肿瘤有关 G链的合成 [1] 端粒酶与端粒DNA结合，端粒中的RNA与凸出的 G链3’端的TTG配对 [2] 以端粒酶的RNA为模板，在G链3’从头合成DNA [3] 延伸6个核苷酸 合成一个重复单位后，端粒酶向新合成的DNA 3’ 端移动，端粒酶中的RNA再与3’端的TTG配对。进 行多个循环，G链3’端形成多个短的重复序列 （2）C链的合成 两个模型 a、G链末端回折，形成发夹结构；DNA聚合酶延伸 b、 Pol a /引发酶合成RNA引物; pol a 延伸; primase primase ...TTGGGGTTGGGGTTGGGGTTGGGGTTGGGGTTG ...AACCCCAACCCC CCCCAAC 5’ 3’ ...TTGGGGTTGGGGTTGGGGTTGGGGTTGGGGTTG ...AACCCCAACCCC CAACCCCAAC 5’ 3’ ...TTGGGGTTGGGGTTGGGGTTGGGGTTGGGGTTG ...AACCCCAACCCC CCAACCC CAACCCCAAC 5’ 3’ ...TTGGGGTTGGGGTTGGGGTTGGGGTTGGGGTTG ...AACCCCAA