【参考】雌性生殖细胞减数分裂的分子基础.doc

一、关键科学问题及研究内容 (一)拟解决的关键科学问题 自然流产、不孕不育、出生缺陷和辅助生殖成功率低的根本原因之一是卵子质量下降，而减数分裂异常是造成卵子质量下降的主要原因，但减数分裂异常的原因迄今还远未阐明。本项目拟解决的关键科学问题是：减数分裂过程如何受到精确调节进而决定雌性生殖细胞的质量？主要分解为如下三个具体问题加以解决：1）雌性生殖细胞减数分裂是如何起始的？ 2）卵母细胞减数分裂阻滞与恢复如何受到调节的？3）遗传物质如何在卵母细胞减数分裂过程中维持稳定？ （二）主要研究内容 针对上述科学问题，我们将主要开展以下四个方面的研究： 1、卵原细胞减数分裂启动及卵母细胞生长起始调节机制 1）卵原细胞减数分裂启动调节 2、卵母细胞减数分裂DNA断裂、修复与重组的分子基础 1）DNA断裂、修复与重组的分子基础及在卵母细胞命运、卵泡形成和染色体数目稳定 二、预期目标 (一)本项目的总体目标 本项目以阐明雌性生殖细胞减数分裂的调控机理为目标，通过对控制雌性生殖细胞减数分裂起始、卵母细胞生长起始、DNA断裂和重组修复、减数分裂阻滞和恢复以及两次细胞分裂过程中染色体精确分离关键基因/蛋白的研究，探讨卵母细胞减数分裂正确有序发生的分子基础，为卵子发生相关疾病的通过该的开展，我国卵子发生的现代化系统研究平台，为我国在该领域的持续发展奠定基础染色体数目稳定争取在上发表论文在发表论文篇，申请专利项造就一支高水平的科研队伍，培养博士研究生，博士后研究人员 三、研究方案 （一）学术思路 生殖健康是人类健康的重要内容。雌性生殖细胞减数分裂异常和卵子质量下降是导致不孕不育及出生缺陷等诸多生殖相关疾病最主要的内在因素，因而减数分裂的精确调控是保证卵子正常发生和维持女性生殖健康的关键环节。因此，本项目针对“减数分裂过程如何受到精确调节进而决定雌性生殖细胞的质量”这一关键科学问题，以减数分裂进程为主线，从卵母细胞减数分裂的起始、阻滞与恢复以及遗传物质稳定性维持机制等方面，研究雌性生殖细胞减数分裂调控的分子基础，以期阐明确保卵子发生过程中减数分裂各核心事件依序精确发生的重大基础科学问题，为减少由于减数分裂异常而引发的不孕不育、自发流产和出生缺陷提供新的靶点，并为辅助生殖技术的完善提供技术保障（图1）。 图1，学术思路示意图 （二）技术途径 本项目以小鼠和果蝇为主要材料，利用遗传学、生物化学、细胞生物学、基因组学和蛋白质组学等多学科交叉研究手段，围绕着卵母细胞减数分裂过程中的几个重要事件：减数分裂起始、卵泡募集、减数分裂重组修复、减数分裂阻滞与恢复、纺锤体检验点和染色体精确分离等，在已有的前期工作基础上，发挥各自的技术特点和优势，各课题间既有侧重点又有交叉，从离体和在体两个层面系统深入地研究雌性生殖细胞减数分裂调控的分子机制以及生物世代间在遗传、进化和多样性方面的分子基础，为人类生殖和发育相关疾病诊治提供分子靶标及理论支持。主要研究路线见图2。 图2，项目总体技术路线图 （三）创新点与特色 1、科学问题的前沿性：本项目以我国人类生殖健康的重大需求为导向，瞄准国际科学前沿，凝练研究目标，集中开展卵母细胞减数分裂关键调控分子研究，发掘鉴定一系列在卵母细胞减数分裂起始、卵泡募集、重组修复、阻滞恢复和染色体精确分离相关的基因/蛋白，这不仅对于我们加深对减数分裂调控这一基本生物学现象的认识具有重要意义，还可能为改善人类的生殖健康开辟新的途径。 2、研究方法的先进性：本课题组RNAi技术、突变mRNA、Morpholino和抗体注射技术以及各种表型分析技术的实验室之一。此外，研究团队拥有完善的蛋白组和转录组分子技术，还建立高度特异性的基因敲除小鼠模型，本项目的调控机制本组小鼠模型TNAP-Cre、Vasa-Cre）和高度特异性的卵泡颗粒细胞基因敲除小鼠模型（）等利用这些实验动物模型，将对阐述常规实验无法进行研究的新机制具有重要作用。研究队伍本项目汇集国家杰出青年百人计划HOWARD COOKE、杨树标）。该团队成员包括具有丰富积累、长期从事卵母细胞和减数分裂研究的科学家，更多的是最近几年本领域崭露头角的优秀青年科学家。研究基础HOWARD COOKE与谭景和教授在哺乳动物生殖细胞减数分裂领域已有几十年的研究经历，在国内、外生殖生物学领域具有重要影响。杨树标教授长期从事人类辅助生殖研究，具备人类卵母细胞研究很好的基础和平台。范衡宇教授和张美佳教授分别在2009年和2010年以第一作者在Science杂志发表有关卵母细胞减数分裂恢复、卵母细胞成熟和排卵调节机制的论文；夏来新博士2010年以第一作者在Cell杂志发表有关生殖细胞命运决定的论文。李磊研究员最近以第一和通讯作者在Developmental Cell、Development等领域知名期刊发表有关卵