神经干动作电位的引导、传导速度和不应期的测定-实验中心.pptVIP

生理学实验 实验一神经干动作电位的引导、传导速度和不应期的测定 —————————— Soochow University 内 容 实验目的 1 实验步骤 2 注意事项 3 实验结果 4 讨论 5 实验目的 　　通过本实验，要求掌握蟾蜍或蛙神经干标本的制备技术，掌握单向、双向神经干动作电位的引导、神经干动作电位传导速度和不应期的测定方法，熟悉数据采集系统的使用方法。 实验步骤 坐骨神经干标本的制备和放置 1 　　该标本的制备和实验1类似，游离坐骨神经以及向下与其相连的胫神经或腓神经，直至足趾。在神经的两端各系一线，穿线结扎，并在结扎远端切断，只保留神经，其他组织全部弃去。将分离好的标本放入任氏液中备用。 　　 实验步骤 　　在神经屏蔽盒的底部铺上湿润的纱布或滤纸，将制备好的坐骨神经标本置于神经屏蔽盒的电极上。神经的粗端放在刺激电极侧，细端放在记录电极侧。随后盖上盒盖（如上图所示）。 实验步骤 实验软件设置 2 将神经屏蔽盒和MedLab系统连接好，点击MedLab菜单“实验／生理学实验”，选择“神经干不应期测定”（如上图所示）。 实验步骤 MedLab放大器、采样和刺激参数按上表设置。选择单刺激，其波宽为0.1-0.2ms，强度为0.05-1.0V。使用连续刺激时，其频率为8-16HZ。 Sampling parameters Stimulating parameters Display mode Recorder Stimulus mode Automatic interval Regulation Sampling interval 25 ms Principal cycle 1 sec X axis compression ratio 2 :1 Wave width 0.1 ms Channel Channel 1 Channel 2 First interval 10 ms DC/AC AC AC Augmenter -0.02 ms Handling name Nerve trunk AP Stimulus marking End amplitude 1 ms Magnification 200~1000 5~50 Pulse number 2 Y axis compression ratio 8 :1 16 :1 Delay time 5 ms 实验步骤 3 项目观察： （1）双相动作电位 （2）测定神经干动作电位的传导速度 （3）不应期的测定 （4） 刺激强度与复合动作电位幅值的关系 （5）单相动作电位 注意事项 制作标本时，神经干的分离越长越好，且避免损伤之。 1 神经屏蔽盒在使用前需用浸润任氏液的棉球拭擦盒内的所有电极，以除去其表面的氧化物。 2 制备标本过程中要经常滴加任氏液，以确保神经湿润。记录前神经要在任氏液中浸泡数分钟。 3 注意事项 神经标本应与每一个电极密切接触，其两端不得接触屏蔽盒壁。 4 避免把神经两端折叠在电极上，以免影响动作电位的大小及波形。 5 在开始时刺激强度不要过强，应由弱趋强，以免过强刺激伤害神经标本。 6 注意事项 尽可能使刺激电极S2与记录电极r1距离大一些，一般应大于2 cm。 7 测量传导速度时，可适当加大刺激频率，以获得稳定的图像。 8 用浸润任氏液的滤纸条加大中间接地电极的面积，可以改善动作电位的图形。 9 实验结果 结合神经干动作电位记录曲线，分别按观察项目的顺序用文字描述结果。 1 2 顺序列出各项观察项目中神经干动作电位曲线 讨 论 在一定范围内，神经干动作电位的幅度随刺激强度的改变而改变，是否与单根神经纤维动作电位的“全或无”的特点相矛盾？ 1 2 如何区分刺激伪迹和动作电位？ 此标本不保留膝关节股骨头及腓肠肌。用玻璃分针分离神经标本，尽可能神经长一些，备用后续实验。 * 请严格遵守上述注意事项。 * * * 在神经屏蔽盒的底部铺上湿润的纱布或滤纸，将制备好的坐骨神经标本置于神经屏蔽盒的电极上。神经的粗端放在刺激电极侧，细端放在记录电极侧。随后盖上盒盖。此步骤注意放置神经标本后，应放好屏蔽盒盖，以避免外界信号的干扰。 （1）用手控单个刺激，强度为1 V，每次扫描时在显示屏上可观察到：跟随着每一刺激伪迹之后即出现一个双相动作电位，注意此双相动作电位的第1相和第2相的方向（正负）、两者波形和幅值是否对称。适当调节刺激的时间延迟，可使动作电位恰好位于示波器的中央部位。 （2）量出刺激电极S2与记录电极r1的距离（d1, mm），并读出示波器上刺激伪迹到r1、r1′记录电极所记录的动作电位起始处的时间（t1 ,ms）,并量出刺激电极S2到r2 的距离(d2,mm）和读出示波器