4 PCR研究法-3.pptVIP

PCR技术 内容提要: 一、PCR技术原理 很少有在公司工作的科研人员得诺贝尔奖， Mullis是其中之一 Kary B. Mullis (1944 -)，在Cetus公司工作期间，发明了PCR。 他原本是要合成DNA引物来进行测序工作， 却常为没有足够多的模板DNA而烦恼。1983年春夏之交的一个晚上，他开车去乡下别墅的路上萌发了用两个引物（而不是一个引物）去扩增模板DNA 的想法…... 一、PCR技术原理 聚合酶链式反应(PCR) : 引物的化学本质是什么？ 单链寡核苷酸DNA或RNA片段。 PCR原理 PCR (Polymerase Chain Reaction):聚合酶链式反应，即PCR技术，是一种在体外快速扩增特定基因或DNA序列的方法，故又称为基因的体外扩增法。 其基本原理是依据DNA半保留复制以及DNA变性和复性原理，通过控制反应温度，耐高温的DNA聚合酶以单链DNA为模板，以dNTP为原料，使引物沿单链模板延伸合成双链DNA。 高温变性，低温退火，适温延伸三个步骤，使目的DNA片段得以迅速扩增。 （一）PCR基本过程 1. PCR循环由三步组成： PCR技术原理 PCR技术原理 PCR技术原理 PCR技术原理 PCR技术原理 PCR技术原理 在模板DNA、引物、4种dNTP存在条件下，依赖DNA 聚合