X1扫描-血红蛋的提取和分离.docVIP

血红蛋白的提取和分离 基础知识 蛋白质各种特性的差异，如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸附性质和对其他分了的亲和力，等等，可以用来分离不同种类的蛋白质。在本课题中，我们将学习蛋白质分离方法中的凝胶色谱法。 (一)凝胶色谱法 凝胶色谱法也称做分配色谱法，所用的凝胶实际上是一些微小的多孔球体，这些小球体大多数是由多糖类化合物构成的，如葡聚糖或琼脂糖。在小球体内部有许多贯穿的通道，当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内(图5—13)。 相对分彳较大的蛋 a·相对分予质量较小的蛋Fi质由于扩敞作用进入凝胶颗粒内部而被滞留；相对分子质量较大的蛋白质被排阻在凝胶颗粒外面，在颗粒之间迅速通过。 b-(1)蛋白质混合物』i柱；(2)洗脱开始，相对分子质趋较小的蛋白质扩散进入凝胶颗粒内；相对分子质量较大的蛋白质则被排阻于颗粒之外；(3)相对分子质量较小的蛋白质被滞留，相对分子质量较犬的蛋白质向下移动；【4)相对分子质量不同的分子完全分开；(5)捌对分子质量较大的蛋白质行程较短，已从层析柱中洗脱出来，相对分子质量较小的蛋白质还在行进中。 图5一l3凝胶色谱法分 (二)缓冲溶液 缓冲作用在日常生活中并不少见。例如，运动鞋的鞋底富有弹性，能够缓冲外力，减少运动员受伤的几率(图5—14)。那么，缓冲溶液