华中科技大学生命科学与技术学院
分子生物学实验报告
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实验一 质粒的小剂量提取——碱裂解法
实验原理:
质粒(Plasmid)是独立于细菌染色体外的,能自主复制且稳定遗传的遗传因子,是一种环状的双链DNA分子,大小为1-200千碱基对(kb),存在于细菌、放线菌、真菌以及一些动植物细胞中,在细菌细胞中最多,在细胞中一般以游离超螺旋状存在。质粒具有自主复制性、不相容性、多拷 贝性、转移性、选择性遗传标记、质粒DNA链上有1到几个限制性内切酶单一识别位点等特点。它可独立游离于细胞质内,也可以整合到细菌染色体中,它离开宿主细胞就不能存活,而它控制的许多生物学功能也是对宿主细胞的补偿。质粒型载体一般只能携带10kb以下的DNA片段,适用于构建原核生物基因文库,cDNA库和次级克隆。
质粒DNA可通过转化引入
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