溶藻弧菌对华贵栉孔扇贝血淋巴中几种酶活力的影响.docVIP

溶藻弧菌对华贵栉孔扇贝体内 几种酶活性的影响( 韩泽新，段秋红，胡文婷* （海南大学海洋学院制药工程系，海南 海口，570228） 摘要：对华贵栉孔扇贝（Chlamys nobilis）注射不同浓度的溶藻弧菌（Vibrio alginolyticus），于注射后6、12、18、48和72 h测定体内过氧化氢酶（CAT）、超氧化物岐化酶（SOD）、碱性磷酸酶（ALP）和酸性磷酸酶（ACP）的活力。结果表明：5×107 cell/mL、5×108 cell/mL组血淋巴中CAT活性均有升高趋势，其中5×108 cell/mL组在18 h极显著增加（P≤0.01），24h显著增加（P≤0.05）。5×108 cell/mL组SOD活性最初表现为抑制，在12 h和18 h显著低于对照组（P≤0.05），24 h后明显升高，5×107cell/mL组与对照组相比差异不明显。肝脏中ALP活性在18 h与对照组相比5×108 cell/mL组极显著升高（P≤0.01），5×107 cell/mL组显著升高（P≤0.05）。注射后ACP活性有明显升高的趋势，5×108 cell/mL组在12 h和18 h显著高于对照组（P≤0.05），且在注射后24 h 5×107 cell/mL、5×108 cell/mL组活性均达到最高。 关键词：华贵栉孔扇贝；溶藻弧菌；酶活性 华贵栉孔扇贝（Chlamys nobilis）属暖水性双壳类软体动物，广泛分布于我国广东、广西、福建东南沿海海域，它具有生长快、养殖周期短，经济效益显著的特点。病害防治是贝类大规模养殖中的重要问题，由于传统的抗生素和化学药品造成耐药性和环境污染，目前对贝类病害防治的研究热点逐渐转移到调动或激活贝类自身免疫系统，提高其非特异性免疫功能和抗病力上[1]。 当病原体入侵贝体时，机体与免疫相关的一些生理生化指标往往会随之发生变化。巨大芽孢杆菌（Bacill megaosomes）感染可诱导帘蛤（Mercenaria mercenaria）血淋巴中溶菌酶的释放[2]。细菌感染对氟吉尼亚牡蛎（Crassostrea virginica）血淋巴中酸性磷酸酶等有选择诱导作用[3]。大肠杆菌弧菌诱导物可增加皱纹盘鲍的抗病能力。CAT活力的影响 华贵栉孔扇贝注射溶藻弧菌后体内CAT活性随时间变化趋势如图1 所示，与注射生理盐水组相比，注射溶藻弧菌5×108 cell/mL组血清中CAT活性均高于对照组，经统计学分析，18 h注射溶藻弧菌5×108 cell/mL组的活力极显著高于对照组（P≤0.01），24 h活力显著高于对照组（P≤0.05），其他各时相无显著差异（P 0. 05)。5×107 cell/mL组CAT的活力跟对照组相比，各个时相均无显著差异。 2.2 注射溶藻弧菌对华贵栉孔扇贝SOD活力的影响 华贵栉孔扇贝注射溶藻弧菌后体内SOD活性随时间变化趋势如图2所示。 随着时间的增加溶藻弧菌5×108 cell/mL组SOD的活性先减小后增大，在12 h达到最低值，24 h后随注射时间的延长明显提高。12 h和24 h小时SOD活力显著低于对照组，其他时相则没有显著差异。5×107 cell/mL 组SOD活性在12小时达到最低，但是跟对照组相比各个时相均无显著差异。 2.3 注射溶藻弧菌对华贵栉孔扇贝ALP活力的影响 华贵栉孔扇贝注射生理盐水和溶藻弧菌后，在不同时相血淋巴中ALP活力变化见图 3。溶藻弧菌5×108 cell/mL组ALP活力在注射后6 h比生理盐水组显著升高，18 h ALP活力极显著升高。5×107 cell/mL组ALP活力在注射后18 h显著升高。48 h后注射弧菌组华贵栉孔扇贝ALP活力均略低于生理盐水组，但无统计学差异。 图 1 注射溶藻弧菌后CAT活性的变化 Fig.1 Changes of CAT activity after injection of Vibrio alginolyticus “*”表示该组于对照组差异显著（p 0.05）；“**”表示该组于对照组差异极显著（p 0.01），下同 图 2 注射溶藻弧菌后SOD活性的变化 Fig.2 Changes of SOD activity after injection of Vibrio alginolyticus 图 3 注射溶藻弧菌后ALP活性的变化 Fig.3 Changes of ALP activity after injection of Vibrio alginolyticus 2.4 注射溶藻弧菌对华贵栉孔扇贝ACP活力的影响 溶藻弧菌感染后，华贵栉孔扇贝体内ACP活性随时间变化趋势如图4所示。结果表明，注射溶藻弧菌后，华贵栉孔扇贝体内 AC