分子生物学PBL-基因表达检测资料.ppt

四、检测p53基因的表达： 根据产物长度制作适宜浓度的琼脂糖凝胶，取适量PCR产物，加上样缓冲液充分混合，点样于事先做好的琼脂糖凝胶点样孔中，10V/cm电泳45－60min。成像系统成像分析。 琼脂糖凝胶电泳分离产物： 电泳结果分析 M 1 2 3 M：Marker 1: cDNA 2: 假阳性对照 3：假阴性对照 Thank you! p53基因表达检测 ——RT-PCR 基因表达的检测 1.DNA水平 2.mRNA水平 3.蛋白质水平 Northern 印记杂交 RT-PCR …… RT-RNA （Reverse Transcription RNA） 反转录PCR是聚合酶链式反应(PCR)的一种广泛应用的变形。 mRNA反转录生成的 cDNA 可作为 PCR 的模板进行扩增，这种在 mRNA 反转录后进行的 PCR 扩增称为 RT-PCR 。 Reverse Transcription PCR RNA提取 cDNA 反转录 PCR Northern 印记杂交 基因表达分析 Northern印记杂交 基因表达水平 随机六核苷酸引物引导 Oligo(dT)引导 特异性引导 1． 随机六聚体引物：用此种方法时，体系中所有RNA分子全部充当了cDNA第一链模板，PCR引物在