溶血对化学发光法检测AFP、CEA结果的影响.docVIP

溶血对化学发光法检测AFP、CEA结果的影响 　　摘要：目的 探讨溶血对化学发光法检测癌胚抗原（CEA）和甲胎蛋白（AFP）结果的影响。方法 通过离心等方法取得非溶血标本、中度溶血标本、重度溶血标本各30份，分别测定甲胎蛋白（AFP）和癌胚抗原（CEA）。通过测定不同的标本的AFP和CEA的结果，观察标本受溶血影响的程度。结果 相比较于非溶血标本，中度溶血标本对于化学发光法检测CEA有影响（P0.05）；而重度溶血标本对于化学发光法检测CEA和AFP有着明显的影响（P0.01）。结论 中度溶血标本使得化学发光法检测CEA有一定的影响，而重度溶血标本对于化学发光法检测CEA和AFP均有着明显的影响。建议在工作中对于标本的检测一定要及时，采用最新鲜的标本，从而减少误差。 　　关键词：溶血；化学发光法；CEA；AFP 　　临床上有多种检测AFP和CEA的方法，如酶联免疫吸附法、放射免疫法等等[1]。而化学发光免疫分析法是最近几年新发展起来的一项标记免疫技术，其自动化程度与灵敏度具高且安全无污染，是一种很好的免疫测定技术，可以用来测定多个项目，如肿瘤标志物、药物浓度等等。我们通过实验来探讨溶血对化学发光法检测CEA和AFP结果的影响，现将结果报道如下： 　　1.资料与方法 　　1.1取样：随机抽取当日静脉血标本30份，待血液标本凝固后，以3000r/min的速度进行约10分钟的离心处理，取离心后每份标本300ul血清即作为非溶血的标本，记作A1、B1组；然后把剩下的标本进行搅拌使其溶血，再以3000r/min的速度进行约10分钟的离心处理，取离心后每份标本300ul血清即得到中度溶血标本，记作A2、B2组；最后将剩下的放入冰箱冷冻室，次日取出自然溶解后以3000r/min的速度进行约10分钟的离心处理，取离心后每份标本300ul血清，即得到重度溶血标本，记作A3、B3组。 　　1.2方法：利用化学发光免疫分析仪分别测定非溶血标本、中度溶血标本、重度溶血标本的CEA与AFP值，每份标本测3次，记录下每次测得的结果数值，最后取平均值得到结果。 　　1.3观察指标：通过测得的中度溶血标本、重度溶血标本的CEA与AFP值与非溶血标本测得的CEA与AFP值做比较，来得出结论。 　　1.4统计学方法：采用spss16.0进行数据的统与处理计，将中度溶血标本、重度溶血标本的CEA与AFP值与非溶血标本测得的CEA与AFP值做t检验，P0.05表示无统计学联系，P0.05，判断差异具有统计学意义，P0.01表示差异具有明显的统计学意义。 　　2.结果： 　　采用t检验对于结果进行统计分析。对于CEA的测定，中度溶血组（A2 ）相对于非溶血组（A1 ），P0.05，差异无明显统计学意义；而重度溶血组（B3 ）相对于非溶血组（B1），P0.01，差异有非常明显的统计学意义。说明中度溶血标本对于AFP的测定无明显影响，而对于CEA的测定，有一定的影响，但影响较轻；而重度溶血标本对于CEA和AFP的测定均有着非常明显的影响，使得CEA的测定结果明显升高，而使得AFP的测定结果明显降低。具体结果见表1。 　　3.讨论： 　　甲胎蛋白（AFP）是在胎儿发育的早期阶段，有卵黄囊和肝脏合成的一种血清糖蛋白，分子量为70Kd，电泳时位于α1球蛋白和白蛋白之间，但在出生后不久便慢慢消失，血清AFP浓度的检测是诊断原发性肝癌和胚胎细胞肿瘤的重要指标；癌胚抗原（CEA）是一种结构复杂的可溶性糖蛋白，分子量约为180Kd，胚胎期的时候主要存在于胎儿的肝脏、胰腺以及胃肠管中，出生后大幅度降低，胃肠道恶性肿瘤时常见血清CEA的异常升高，而在肺癌、乳腺癌等其他恶性肿瘤患者的血清中，CEA也常常升高，故而CEA是一种广谱肿瘤标志物[2]。 　　血液标本中的CEA和AFP可以用多种方法予以测定，常规的有酶联免疫吸附法、放射免疫法等等，而近年来发展迅速的化学发光免疫分析法具有灵敏度高、自动化程度高、安全无污染等优点[3]。而化学发光免疫分析法的原理是采用双抗体夹心法，首先加入抗体致敏微粒，然后再在其中加入适量的待测样本，最后需要将标记抗体加入其中即可。由于化学发光氧化剂具有氧化作用，我们便可以通过这种氧化作用，测得的光量子数就和待测样本中的抗原浓度成正比，从而测出结果[4]。化学发光反应的原理实际上与酶联免疫以及放射免疫中的双抗体夹心法和竞争法有着非常类似的地方[5-6]。但是化学发光反应是测得的光量子数就和待测样本中的抗原浓度成正比，即线性关系，其本身并不受到颜色反应的一些影响与干扰。从理论上来说的话，黄疸、脂血以及溶血标本并无影响，但有研究显示，到了实际的操作检测中，标本的溶血程度不同对于化学免疫检测的项目可以产生不同程度的影响[3-4]。研究显示，当标本溶血