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- 2017-06-08 发布于重庆
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第7章蛋白质的分离纯化与表征
第章 蛋白质的分离、纯化与表征
、是非题
1 ( )
2 逆流分溶和纸层析,这两个分离氨基酸的方法是基于同一原理 ( )
3 蛋白质的SDS聚丙稀酰胺凝胶电泳和圆盘电泳是两种完全不同的技术 ( )
4 凝胶过滤法可用于测定蛋白质的分子量,分子量小的蛋白质先流出柱,分子量大的后流出柱 ( )
5 蛋白质在小于等电点的PH溶液中,向阳极移动,而在大于等电点的PH溶液中,将向阴极移动 ( )
6 电泳和等电聚焦都是根据蛋白质的电荷不同,即酸碱性质不同的两种分离蛋白质混合物的方法 ( )
答案
1错 2对 3对 4错 5错 6对
二、填空题
1 现欲分离某蛋白质溶液中的四个蛋白质成分,它们分子量和等电点列于表内
蛋白质成分 Mr pI
A 12000 10
B 62000 4
C 28000 7
D 9000 5
如不考虑次要因素,它们在葡聚糖凝胶G-75柱上分离时,流出的先后次序将是: 最先,,其次,最后流出的蛋白质是如选用羧甲基纤维素柱分离上面四种蛋白质,并用盐浓度梯度洗脱,流出的先后次序将是:
2 分离蛋白质混合物的各种方法主要根据蛋白质在溶液中的下列性质 , , , 3 蛋白质时两性电介质,当溶液的PH在其等电点以上时蛋白质分子带 电荷,而PH在等电点一下时,带 电荷
答案
1(B)(C)(A)(D)(B)(D)(C)(A)
2 分子大小 溶解度 电荷 吸附作用/对其它分子的亲和力
3(负)(正)
三、选择题
1.下列哪种方法可得到蛋白质的“指纹”图谱 A.酸水解,然后凝胶过滤 B.彻底碱水解并用离子交换层析测定氨基酸的组成 C.用氨肽酶降解并测定被释放的氨基酸的组成 D.用胰蛋白酶降解,然后进行纸层析和纸电泳 E.用2,4-二硝基氟苯处理蛋白质
2.若用电泳分离Gly-Lys、Asp-Val和Ala-His三种二肽,在下列哪个pH条件下电泳最为合适? A.pH2以下 B.pH2~4 C.pH7~9 D.pH10~12 E.pH12以上
?3.进行疏水吸附层析时,以下哪种条件比较合理 A.在有机溶剂存在时上柱,低盐溶液洗脱 B.在有机溶剂存在时上柱,高盐溶液洗脱 C.低盐条件下上柱,高盐溶液洗脱 D.高盐溶液上柱,按低盐,水和有机溶剂顺序洗脱。 E.低盐缓冲液上柱,低盐洗脱
?4.人工合肽时,采用下列哪种方法可以活化氨基? A.加入三乙胺 B.甲酰化 C.乙酰化 D.烷基化 E.酸化
1D 2C 3D 4A
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