5第五章 酶分子修饰课件.pptVIP

Chapter 5 Modification of Enzyme Molecule 酶分子修饰 什么是酶分子修饰？ 提高酶的活力 增强酶的稳定性 降低或消除酶的抗原性 研究和了解酶分子中主链、侧链、组成单位、金属离子和各种物理因素对酶分子空间构象的影响 第一节 金属离子置换修饰 把酶分子中所含的金属离子换成另一种金属离子，使酶的催化特性发生改变的修饰方法。 常用的金属离子 Ca2+，Mg2+，Mn2+，Zn2+，Co2+，Cu2+，Fe2+ 适用性 本来在结构中含有金属离子的酶。 一、金属离子置换修饰的方法 （1）加入一定量的EDTA（乙二胺四乙酸）等金 属螯合物到酶液中，与酶分子中的金属离子螯合； （2）通过透析、超滤、分子筛层析等方法，从酶液中去除 EDTA-金属螯合物； （3）加入另一种金属离子到酶液中，酶蛋白与新加入的金属离子结合。 二、金属离子置换修饰的作用 １、阐明金属离子对酶催化作用的影响 ２、提高酶活力 锌型蛋白酶置换成钙型蛋白酶，酶活力可提高20-30倍；制成晶体，比锌型蛋白酶结晶的酶活力提高2-3倍。 ３、增强酶稳定性 天然含铁超氧化物歧化酶中铁原子被锰取代后,酶的稳定性和抑制作用发生显著改变,重组的含锰酶对H2O2的稳定性显著增强,对NaH3的抑制作用的敏感性显著降低。 ４、改变酶动力学特性 酰化氨基酸水解酶活性部位中的锌被钴取代时,酶的底物