培训课件-标记免疫技术.pptVIP

ELISA技术类型： ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体，在这种测定方法中有3种必要的试剂： 固相的抗原或抗体， 酶标记的抗原或抗体， 酶作用的底物。 1．双抗体夹心法 特点： 非竞争结合反应 常用于抗原的检测 适用于分子中具有至少两个抗原决定簇的多价抗原，而不能用于小分子半抗原的检测 所用两种抗体分别针对同一个抗原分子的不同抗原决定簇 2．间接法 3.竞争法 特点： 用于抗原和半抗原的定量测定，也可对抗体进行测定。 酶标Ag（Ab）与样品或标准品中的非标记Ag（Ab）具有相同的与固相Ab(Ag)结合的能力。 反应体系中，固相Ab（Ag）和酶标Ag（Ab）是固定限量的，且前者的结合位点少于酶标记与非标记Ag（Ab）的分子数量和。 反应后，结合与固相载体上复合物中被测定的酶标Ag（Ab）的量（酶活性）与样品中非标记Ag（Ab）的浓度成反比。 4.捕获法（反向间接法） 主要用于 血清中某种抗体亚型成分（如IgM）的测定。 基本原理： 固相抗IgM 待检标本(IgM) 抗原(与特异抗体结合) E 酶标抗体 底物  第三节 膜载体的酶免疫测定 固相膜免疫测定与ELISA相类似,其特点是以微孔膜作为固相.标记物可用酶和各种有色微粒子,如彩色乳胶、胶体金等。常用固相膜为硝酸纤维素膜。 类型：免疫渗滤试验：穿流形式