实验四PCR扩增基因特异片段.docVIP

实验四 PCR扩增基因特异片段 一、实验目的 1、学会PCR仪的使用方法。 2、掌握PCR反应的实验技术。 二、实验原理 聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction）简称PCR。聚合酶链式反应（PCR）是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法，由高温变性、低温退火（复性）及适温延伸等几步反应组成一个周期，循环进行，使目的DNA得以迅速扩增，具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。它不仅可用于基因分离、克隆和核酸序列分析等基础研究，还可用于疾病的诊断或任何有DNA,RNA的地方．聚合酶链式反应又称无细胞分子克隆或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增技术GLBI蛋白是玉米胚中含量最丰富的蛋白质之一，其编码基因glb1位于第一染色体长臂，基因表达仅限于种子组织。该蛋白对于幼苗生长与存活并非必需。本实验扩增glb1基因部分序列，全长1200bp左右。 真核生物基因组中编码核糖体的基因包括28S rDNA、5S rDNA、18S rDNA和5.8S rDNA 4 种,它们在染色体上头尾相连、串联排列,相互之间由间隔区分隔。其中18S、5.8S和28S rDNA基因组成一个转录单元三者高度保守,适合于较高等级水平的生物群体间的系统分析, 其间的间隔区为内转录间隔区 Internal Transcribed Spacer, ITS 。94℃预变性5 min；94