高三生物基因工程二轮复习.docVIP

基 因 工 程 图1表示含有目的基因D的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspI、BamHI、MboI、SmaI4种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。请回答下列问题： （1）反转录法是基因工程中获得目的基因的常用方法，该方法以的mRNA为模板，在 酶的催化下，合成互补的单链DNA，然后在 作用下合成双链DNA，从而获得基因。在提取模板RNA过程中要特别注意防止RNA的水解，试提出一种保护措施： 。 （2） 图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由 连接，而两条脱氧核苷酸链中配对的碱基之间通过 连接。一条脱氧核苷酸链中相邻两个脱氧核苷酸之间通过 连接。 （3）限制酶BamHI切割DNA后形成的黏性末端是 。同尾酶是指切割DNA分子后能产生相同黏性末端的限制酶，以上4种限制酶中属于同尾酶的是 。 （4）一个图1所示的分子 个游离的磷酸基团一个图所示的 个游离的磷酸基团（）用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，使用切割，原是。使用切割，原是 。为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入 酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求？ 。若对图中质粒进行改造，插入的Sma酶切位点越多，质粒的热稳定性越 。基因表达载体除了图示外，还