分子细胞生物学作业概述.doc

分子细胞生物学 简述表达调控的基本概念和真核基因表达调控的特点（10分）。 简述转录后水平的基因沉默现象、基因表达调控的新途径及其应用现状（10分）。 请你简述细胞分化，干细胞发展现状，如何理解认识现状与应用关系（10分）？ 请叙述细胞周期内容与细胞周期调控实验的基本原理，请你设计一种有关细胞周期调控的实验（10分）。 细胞信号理论与实践的应用现状，从你所理解的几种细胞信号通路，谈谈验证实验设计及其依据原理（10分）。 由基因选择性表达结果与细胞分化关系，生物的表观遗传的关系（10分）。 细胞凋亡及其信号转导关系说明细胞凋亡须具备必要的基本元件，请举一列叙述说明（10分）。 如何理解真核细胞基因表达调控的复杂性（10分）？ 根据你所从事的研究方向，探讨与分子细胞生物学的关系及应用（20分） 简述表达调控的基本概念和真核基因表达调控的特点（10分）。 答：基因表达调控指位于基因组内的基因如何被表达成为有功能的蛋白质(或RNA)，在什么组织中表达，什么时候表达，表达多少等等。在内、外环境因子作用下，基因表达在多层次受多种因子调控。基因表达调控的异常是造成突变和疾患的重要原因。 转录水平的调控Britten和Davidson于1969年提出的真核生物单拷贝基因转录调控的模型——Britten—Davidson模型。该模型认为在整合基因的5’端连接着一段具有高度专一性的DNA序列，称之为传感基因。在传感基因上有该基因编码的传感蛋白。外来信号分子和传感蛋白结合相互作用形成复合物。该复合物作用于和它相邻的综合基因组，亦称受体基因，而转录产生mRNA，后者翻译成激活蛋白。真核生物基因组中等重复DNA序列和单拷贝DNA序列的排布形式，说明该模型有其合理型。染色质结构对转录调控的影响真核基因的活跃转录是在常染色质进行的。转录发生之前，常染色质往往在特定区域被解旋或松弛，形成自由DNA，这种变化可能包括核小体结构的消除或改变，DNA本身局部结构的变化，如双螺旋的局部去超螺旋或松弛、DNA从右旋变为左旋，这些变化可导致结构基因暴露，RNA聚合酶能够发生作用，促进了这些转录因子与启动区DNA的结合，导致基因转录，实验证明，这些活跃的DNA首先释放出两种非组蛋白，（这两种非组蛋白与染色质结合较松弛），非组蛋白是造成活跃表达基因对酶高度敏感的因素之一。转录后水平的调控真核生物基因转录在细胞核内进行，而翻译则在细胞质中进行。在转录过程中真核基因有插入序列，结构基因被分割成不同的片段，因此转录后的基因调控是真核生物基因表达调控的一个重要方面，首要的是RNA的加工、成熟。各种基因转录产物RNA，无论rRNA、tRNA还是mRNA，必须经过转录后的加工才能成为有活性的分子。翻译水平上的调控蛋白质合成翻译阶段的基因调控有三个方面：蛋白质合成起始速率的调控； MRNA的识别； 激素等外界因素的影响。蛋白质合成起始反应中要涉及到核糖体、mRNA蛋白质合成起始因子可溶性蛋白及tRNA，这些结构和谐统一才能完成蛋白质的生物合成 简述转录后水平的基因沉默现象、基因表达调控的新途径及其应用现状（10分）。 答：转录后水平的基因沉默(Posttranscriptional Gene Silencing，PTGS)是指转基因在细胞核里能稳定转录，细胞质里却无相应的稳定态mRNA存在的现象。不同研究组给了这一神秘机制不同的名称：植物学家称之为共抑制(co-suppression)、菌类学家称之为静息作用(quelling)、昆虫学家称之为RNA干预(RNA interference，RNAi)等。PTGS是1条在mRNA水平上使特定基因沉默的新的细胞途径。该途径可帮助生物体抵御病毒感染和基因损伤。 PTGS被认为是一种古老的自我防御的进化机制。大量工作揭示了它是通过降解mRNA来阻止基因表达的。当细胞受到某种危险,如病毒侵袭或转座子的活化。这一机制就被宿主细胞内双链RNA或某些其它不正常核苷酸所启动。细胞指导RNA裂解酶(核糖核酸酶)特异地降解与诱因相关的RNA，而不影响其它基因。 基因表达调控的新途径及其应用现状：基因沉默是一种非常有用的研究工具。PTGS比在基因编码区加入选择标记的基因敲除技术更优越。它可以用于生物不同的发育阶段加以选择。而通常敲除1个基因可能在还未知道该基因功能时会杀死该胚胎。即使该胚胎能够成活，在发育早期阶段，不正常的导入会掩饰该基因在较晚时期的次级效应。利用PTGS生物学家能关闭某种特定的生物基因推断该基因的功能。利用PTGS让生物胚胎发育的不同阶段的某些基因沉默可揭示胚胎发育复杂性。 在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态结构和生理功能上发生稳定性的差异的过程称为细胞分化（cellular differentiation）。细胞分化