一、课题背景 尿素是一种重要的农业氮肥。尿素不能直接被农作物吸收。土壤中的细菌将尿素分解成氨之后才能被植物利用。 细菌利用尿素的原因 土壤中的细菌分解尿素是因为它们能合成脲酶 CO(NH2)2 脲酶 + H2O + CO2 2NH3 常见的分解尿素的微生物 芽孢杆菌、小球菌、假单胞杆菌、克氏杆菌、棒状杆菌、梭状芽孢杆菌等 课题目的 ①从土壤中分离出能够分解尿素的细菌 ②统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌 二、 研究思路: ㈠.筛选菌株 ㈡.统计菌落数目 ㈢.设置对照 1.实例: 启示:寻找目的菌种时,要根据它对生存环境的要求,到相应的环境中去寻找。 原因:因为热泉温度70~800C,淘汰了绝大多数微生物,只有Taq细菌能够生存。 PCR技术要求使用耐高温(930C)的DNA聚合酶。 ㈠.筛选菌株 方法:配制选择培养基 2.实验室中微生物的筛选原理: 人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物生长。 15.0g 琼脂 1.0g 尿素 10.0g 葡萄糖 0.2g MgSO4·7H2O 2.1g Na2HPO4 1.4g KH2PO4 3.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数所需培养基: ①从物理性质看此培养基属于哪类? 固体培养基 ②在此培养基中哪些作为碳源、氮源? 碳源:葡萄糖、尿素
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