仪器第七章紫外可见重点分析.pptVIP

一、概述 – 分子光谱 一、概述 – 分子光谱 二、紫外可见光谱 二、紫外可见吸收光谱 二、紫外可见吸收光谱 二、紫外可见吸收光谱 紫外光谱中常用的术语 紫外光谱中常用的术语 紫外光谱中常用的术语 紫外光谱中常用的术语 有机化合物紫外-可见吸收光谱 有机化合物紫外-可见吸收光谱 有机化合物紫外-可见吸收光谱 有机化合物紫外-可见吸收光谱 二、紫外可见吸收光谱 溶剂对紫外吸收光谱的影响 化合物的定性分析 异构体的确定 成分分析 测定蛋白浓度 三、光的吸收定律 3. 偏离朗伯—比耳定律的原因 当溶液浓度较高时，标准曲线常发生弯曲，称为偏离朗伯—比耳定律。 原因 物理性因素 化学性因素 三、光的吸收定律 物理性因素 难以获得真正的纯单色光—— 仪器的原因 选择比较好的单色器 将入射波长选定在待测物质的最大吸收波长且吸收曲线较平坦处 解决办法 前提条件之一：入射光为单色光 三、光的吸收定律 化学性因素 假定：所有的吸光质点之间不发生相互作用 当溶液浓度c 10 －2 mol/L 时，吸光质点间可能发生缔合等相互作用，直接影响了对光的吸收。 溶液中存在着离解、聚合、互变异构、配合物的形成等化学平衡时。使吸光质点的浓度发生变化，影响吸光度 例： 铬酸盐或重铬酸盐溶液中存在下列平衡： CrＯ42- ＋2H＋ = Cr2Ｏ72- ＋H2Ｏ 溶液中CrＯ42-、 Cr2Ｏ72-的颜色不同，吸光性质也不相同,故溶液pH 对测定有重要影响. 三、光的吸收定律 四、紫外可见分光光度计 四、紫外可见分光光度计 Hitachi U 3010 紫外可见分光光度计 普析通用 TU-1221型 紫外可见分光光度计 四、紫外可见分光光度计 波长330~800 nm 722型光栅分光光度计 四、紫外可见分光光度计 光源 单色器 样品室 检测器 显示 基本组成 与AAS仪器有何相同和差异？ 显示屏 波长调节旋钮 比色池架 四、紫外可见分光光度计 光源 四、紫外可见分光光度计 1. 光源 在整个紫外光区或可见光谱区可以发射 连续 光谱 具有足够的辐射强度 较好的稳定性 较长的使用寿命 （1）可见光区：钨灯作为光源，其辐射波长 范围在320～2500 nm。 （2）紫外区：氢、氘灯，发射185～400 nm 的连续光谱。 将光源发射的复合光分解成单色光并可从中选出一任波长单色光的光学系统。 四、紫外可见分光光度计 2. 单色器 棱镜、光栅 四、紫外可见分光光度计 3. 样品室 在紫外区须采用石英池，可见区一般用玻璃池。 四、紫外可见分光光度计 利用光电效应将透过吸收池的光信号变成可测的电信号 4. 检测器 光电池、光电管或光电倍增管。 5. 结果显示记录系统 检流计、数字显示、微机进行仪器自动控制和结果处理 显色反应及显色条件的选择 显色反应 将待测组分转变成有色化合物的反应 显色剂 与待测组分形成有色化合物的试剂 五、应用- 无机分析 显色反应类型 络合反应 氧化还原反应 取代反应 缩合反应 选择要素 灵敏度高 选择性好 生成物稳定 组成恒定 显色剂在测定波长处无明显吸收 对比度大，要求△? 60nm。 显色条件的选择 1.显色剂用量 2.反应体系的酸度 影响金属离子和显色剂的存在形式、络合物组成、稳定性及反应进行程度 五、应用- 无机分析 显色条件的选择 3.显色时间 4.显色温度 5. 溶剂 6.干扰的消除 选择适当的显色反应条件 加入掩蔽剂 分离干扰离子 五、应用- 无机分析 吸光度测量条件的选择 1.选择适当的入射波长 一般应该选择λmax为入射光波长。但如果λmax处有共存组分干扰时，则应考虑选择灵敏度稍低但能避免干扰的入射光波长。 2.控制适宜的吸光度（读数范围） Tmin＝36.8%, Amin＝0.434 最佳读数范围 T %=70 ％ ～10％ A = 0.15～1.0 五、应用- 无机分析 3.选择合适的参比溶液 若仅待测组分与显色剂反应产物有吸收，其它试剂均无吸收，用纯溶剂（水)作参比溶液； 若显色剂或其它试剂略有吸收，试液本身无吸收，用“试剂空白”(不加试样溶液)作参比溶液； 若待测试液有吸收，而显色剂等无吸收，则可用“试样空白”(不加显色剂)作参比溶液。 五、应用- 无机分析 定性分析 结构分析 标准谱图对照 经验规则计算 官能团鉴定 顺反异构体的确定 互变异构体的确定 P147~149 五、应用- 有机分析 利用紫外光谱可以推导有机化合物的分子骨架中是否含有共轭结构体系,如C=C－C=